2022年高考生物一輪總復習 11.4.3微生物的培養(yǎng)與應用限時規(guī)范特訓（含解析）

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1、2022年高考生物一輪總復習 11.4.3微生物的培養(yǎng)與應用限時規(guī)范特訓（含解析） 一、選擇題(每題4分，共16分) 1．制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的下列操作中，不正確的是(　　) A. 操作流程是計算、稱量、溶化、滅菌和倒平板 B. 將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同倒入燒杯中再加水、去紙 C. 滅菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2%瓊脂，并使其溶解 D. 將培養(yǎng)基冷卻到約50 ℃時，在酒精燈火焰附近倒平板 解析：瓊脂加入到牛肉膏蛋白胨溶液中，溶化后再滅菌。 答案：C 2. 關于消毒滅菌的說法，正確的是(　　) A. 干熱滅菌法適用于一切微生物培養(yǎng)器材的滅菌，如金屬用具 B. 高壓

2、蒸汽滅菌法的壓力一般為121 kPa，溫度為100 ℃ C. 通過煮沸消毒法可以殺死所有病原微生物及其芽孢 D. 接種過程中，試管口可以通過灼燒滅菌法滅菌 解析：選項A，能耐高溫的、需要保持干燥的物品均可以采用干熱滅菌法，此法并非適用于一切微生物培養(yǎng)器材，說法錯誤；選項B，高壓蒸汽滅菌法的壓力一般為100 kPa，溫度為121 ℃，說法錯誤；選項C，煮沸消毒法可以殺死病原微生物和一部分芽孢，說法錯誤；選項D，接種過程中，試管口可以通過灼燒滅菌法滅菌，說法正確。 答案：D 3．某學者欲研究被石油污染過的土壤中細菌數(shù)量，并從中篩選出能分解石油的細菌。下列操作錯誤的是(　　) A. 利用

3、平板劃線法對細菌進行計數(shù) B. 用以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選 C. 采用稀釋涂布平板法分離菌種 D. 稱取和稀釋土壤樣品時應在火焰旁 解析：分離細菌常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，但平板劃線法不能對細菌進行計數(shù)；篩選能分解石油的細菌，要以石油作為培養(yǎng)基中唯一的碳源； 篩選細菌的整個操作過程都需要在無菌條件下進行，所以應在火焰旁進行。 答案：A 4. 有些細菌含有尿素分解酶，能將尿素瓊脂培養(yǎng)基中的尿素分解生成氨，氨溶于水變成氫氧化銨，導致培養(yǎng)基變成堿性，使酚紅指示劑呈現(xiàn)紅色。下列能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是(　　) A. KH2PO4，Na2HPO4，MgSO4·7

4、H2O，葡萄糖，尿素，瓊脂，水 B. KH2PO4，Na2HPO4，MgSO4·7H2O，葡萄糖，瓊脂，水 C. KH2PO4，Na2HPO4，MgSO4·7H2O，尿素，瓊脂，水 D. KH2PO4，Na2HPO4，MgSO4·7H2O，牛肉膏，蛋白胨，瓊脂，水 解析：選擇含有尿素分解酶的細菌，要用固體培養(yǎng)基，故培養(yǎng)基中應含有瓊脂，培養(yǎng)基中應以尿素為唯一氮源，還應有碳源、水、無機鹽等，A項符合。 答案：A 二、非選擇題(44分) 5. (10分)[xx·合肥二檢]燒傷病人容易感染綠膿桿菌，引起化膿性感染，比阿培南、美羅培南、頭孢菌素和碳青霉烯類抗生素都是非常經(jīng)典的抗綠膿桿菌的藥

5、物。臨床使用抗生素前，有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時，從病人身上獲取少量樣本，按照一定的實驗步驟操作，以確定該病人體內(nèi)的綠膿桿菌對不同抗生素的敏感性。 (1)獲取綠膿桿菌單菌落：配制適于綠膿桿菌生長的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分一般含有________、________、水和無機鹽，調(diào)節(jié)pH至7，滅菌處理，待培養(yǎng)基冷卻至50 ℃時，在________附近倒平板。經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得單菌落。 (2)檢測綠膿桿菌對不同抗生素的敏感性：取該單菌落適當稀釋，用________法接種于固體培養(yǎng)基表面，使其均勻生長，布滿平板。將分別含等劑量的比阿培南、美羅培南、頭孢菌素和碳青霉烯類抗生素的同大小

6、的濾紙片均勻置于該平板的不同位置，適宜條件下培養(yǎng)一段時間，結(jié)果是含不同抗生素的濾紙片周圍均出現(xiàn)透明圈，這說明綠膿桿菌對上述抗生素________；含頭孢菌素的濾紙片周圍的透明圈比含美羅培南的小，這說明________________；含比阿培南、碳青霉烯類的濾紙片周圍的透明圈也比含美羅培南的小，且比阿培南透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，請推測此菌落產(chǎn)生的可能原因：一是________________，二是_______________________。 (3)根據(jù)上述實驗結(jié)果，為達到抗綠膿桿菌的目的，對于該患者來說最好應選用抗生素________。 解析：(1)綠膿桿菌為異養(yǎng)型微生物，培養(yǎng)基中需要

7、加入碳源、氮源、水和無機鹽等成分。接種時為防止污染應在酒精燈火焰附近的無菌區(qū)接種。(2)含等劑量、不同種抗生素濾紙片處理的周圍均出現(xiàn)透明圈，說明綠膿桿菌對不同種抗生素均敏感。含頭孢菌素的濾紙片周圍的透明圈比含美羅培南的小，說明綠膿桿菌對頭孢菌素的敏感性比對美羅培南弱。比阿培南的透明圈中出現(xiàn)一個菌落可能的原因是被其他雜菌污染或綠膿桿菌產(chǎn)生了耐藥性突變。(3)綠膿桿菌對美羅培南的敏感性最強，患者服用后抑制綠膿桿菌的效果最好。 答案：(1)碳源　氮源　酒精燈火焰　(2)涂布　敏感　綠膿桿菌對頭孢菌素的敏感性比對美羅培南弱　雜菌污染　抗比阿培南的綠膿桿菌(或綠膿桿菌產(chǎn)生耐藥性突變)形成的菌落　(3)

8、美羅培南 6．(12分)大腸桿菌是“明星菌”，在生物技術上常用作“工程菌”。某生物小組的同學利用實驗室提供的某品系大腸桿菌及其他必需材料，對該品系大腸桿菌進行了培養(yǎng)、計數(shù)。 (1)大腸桿菌在生長過程中對各種營養(yǎng)成分所需的量不同，故制備培養(yǎng)基時各營養(yǎng)成分要有合適的________。 (2)在制備固體培養(yǎng)基進行倒平板操作時，平板冷凝后，甲同學將平板倒置，其原因是________________________________。 (3)乙同學采用平板劃線法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選，在每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，其目的是_________________。 (4)丙、丁同學用稀釋涂布平板法

9、測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)。在對應稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下兩種統(tǒng)計結(jié)果：丙同學在該濃度下涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)為230；丁同學在該濃度下涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為21、212、256，然后取其平均值163作為統(tǒng)計結(jié)果。請評價這兩位同學的實驗結(jié)果的有效性： ①丙同學的結(jié)果________，原因是________________。 ②丁同學的結(jié)果________，原因是________________。 (5)戊同學在測定大腸桿菌的密度時發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落，由此他判斷該品系大腸桿菌被污染了。他的判斷是否確切？為什么？ _________________

10、__________________________________________________________________________________________________。 解析：(1)從培養(yǎng)基制備的重要原則入手分析，制備培養(yǎng)基時要注意控制各種營養(yǎng)物質(zhì)的比例。(2)平板冷凝后培養(yǎng)皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。(3)灼燒接種環(huán)的目的是殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，以免對實驗結(jié)果造成影響。(4)實驗時，至少要涂布3個平板作為重復組，才能增強實驗的

11、說服力和準確性，丁同學雖然涂布了3個平板，但其中一個平板上的菌落數(shù)與另外兩個平板上的菌落數(shù)相差甚遠，故不能取這3個平板上的菌落的平均值作為統(tǒng)計結(jié)果。(5)判斷雜菌的來源時，只有排除其他可能的情況才能得出確切的結(jié)論。 答案：(1)比例　 (2)培養(yǎng)皿蓋上會凝結(jié)有水珠，平板倒置可防止水珠落入培養(yǎng)皿中而造成污染，還可使培養(yǎng)皿表面的水分更好地揮發(fā) 　 (3)殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種　 (4)①不合理　 沒有設置重復組，結(jié)果不具有說服力　 ②不合理 　 一個平板上的計數(shù)結(jié)果與另外兩個相差太遠(或在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，或只簡單地計算了平均值)　(5)不確切。因為不能確定雜菌是來自

12、培養(yǎng)基還是來自培養(yǎng)過程 7．(10分)從自然菌樣中篩選較理想的生產(chǎn)菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測定。 (1)不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適宜的環(huán)境中采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化。篩選嗜鹽菌的菌樣應從________環(huán)境中采集。 (2)富集培養(yǎng)指創(chuàng)設僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件，使其數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應選擇________的培養(yǎng)基，并在________條件下培養(yǎng)。 (3)如圖甲、乙是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請分析接種的具體方法。

13、 獲得圖甲效果的接種方法是______________，獲得圖乙效果的接種方法是____________。 (4)配制培養(yǎng)基時各種成分在溶化后分裝前必須進行________，接種前要進行________。在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在________條件下進行。 解析：采集菌樣時必須考慮所分離的微生物的生理特性和相應的土壤特點。培養(yǎng)微生物時則要考慮它對營養(yǎng)的需要和對氧氣、pH的不同要求。分析圖甲和圖乙不難得出相應的接種方法。配制培養(yǎng)基的步驟包括計算、稱量、溶化、調(diào)節(jié)pH、分裝、包扎、滅菌、倒平板等。 答案：(1)海灘等高鹽　 (2)以淀粉為唯一碳源 　高溫 (3)稀釋涂布

14、平板法 　 平板劃線法　 (4)pH調(diào)整　高壓蒸汽滅菌 　 無菌 8. (12分)選擇培養(yǎng)是微生物學中最強有力的技術手段之一。該技術主要是利用不同微生物間生命活動特點的不同，制定環(huán)境條件，使僅適應該條件的微生物旺盛生長，從而使其在群落中的數(shù)量大大增加，人們能夠更容易地從中分離到所需的特定微生物。選擇條件可根據(jù)所需分離的微生物的特點，從物理、化學、生物及綜合多個方面進行選擇，如溫度、pH、紫外線、高壓、光照、氧氣、營養(yǎng)等許多方面。下圖描述了采用選擇方法從土壤中分離能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物的實驗過程。 (1)本實驗所需培養(yǎng)基為________，碳源為________。 (2)

15、實驗原理是________________________________________。 (3)①→③重復培養(yǎng)的目的是____________________________ ____________________________________________。 (4)⑤的菌落中大部分是降解________的微生物。 (5)⑥為________組，⑦為________組，設置⑥的目的是 ________________________________________________________。 (6)⑤→⑥采用________法，接種到⑥的培養(yǎng)基中，在操作過程中為防止污

16、染應注意的事項是______________________________。 解析：選擇培養(yǎng)又稱增殖培養(yǎng)，主要是利用不同微生物的生長繁殖對環(huán)境和培養(yǎng)基的特殊要求進行富集培養(yǎng)和分離。要從土壤中分離能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物，必須根據(jù)該微生物的特點，采用以對羥基苯甲酸為唯一碳源的培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)。設置對照實驗的目的是說明通過選擇培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標微生物。 答案：(1)選擇培養(yǎng)基　對羥基苯甲酸　 (2)利用以對羥基苯甲酸為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，經(jīng)富集培養(yǎng)，選擇出能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物　 (3)增大分解對羥基苯甲酸微生物的比例　 (4)對羥基苯甲酸　 (5)對照　實驗　說明通過富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標微生物　 (6)單細胞挑取　接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌，燒紅的接種環(huán)在火焰旁冷卻，同時打開皿蓋挑取菌落接種到試管中，并塞好棉塞，接種環(huán)在火焰上灼燒，殺滅殘留物