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1、技能訓練1 實驗室常用玻璃器皿洗刷、消毒和儀器使用,實訓目標 熟悉各種玻璃器皿的洗刷和滅菌方法; 了解傳染病實驗室常用儀器的構造; 熟悉儀器的使用方法和注意事項。,儀器材料 試管、刻度吸管、培養(yǎng)皿、三角燒瓶、燒杯、量筒、量杯、漏斗、乳缽、普通棉花、脫脂棉、紗布、牛皮紙、舊報紙、新潔爾滅、來蘇兒、石炭酸、肥皂粉、重鉻酸鉀、粗硫酸、鹽酸、橡膠手套、橡膠圍裙等; 電熱恒溫培養(yǎng)箱、電熱干燥箱、高壓蒸氣滅菌器、電冰箱、電動離心機、電熱恒溫水浴箱等。,方法步驟 (一)玻璃器皿的洗刷、包裝和消毒 (二)實驗室常用儀器的使用,(一)玻璃器皿的洗刷、包裝和消毒,1玻璃器皿的洗刷 2玻璃器皿的包裝 3玻
2、璃器皿的滅菌,1玻璃器皿的洗刷,(1)新購入的玻璃器皿 用12鹽酸溶液浸泡數(shù)小時或過夜,再用清水反復沖刷,最后用蒸餾水沖洗23次,倒立使之自然干燥或烘干。 (2)一般使用過的器皿 可于用后立即用清水沖凈。凡沾有油污的,可用肥皂水煮半小時后趁熱刷洗,再用清水沖洗干凈,最后用蒸餾水沖洗23次,晾干。 (3)載玻片 用畢立即浸泡于消毒液中,經12d取出,用洗衣粉液煮沸5min,再用毛刷刷去油脂及污垢,然后用清水沖洗,晾干或將洗凈的玻片用蒸餾水煮沸,趁熱把玻片攤放在干毛巾或干紗布上,稍等片刻,玻片即干,保存?zhèn)溆没蚪萦?5酒精中備用。,(4)細菌培養(yǎng)用過的試管、平皿等 須高壓蒸氣滅菌
3、后,倒去內容物,用熱肥皂水刷去污物,然后用清水沖洗,最后用蒸餾水沖洗23次,晾干或烘干。 (5)對污染有病原微生物的吸管 用后投入盛有消毒液(23來蘇兒或5石炭酸)的玻璃筒內(筒底必須墊有棉花,消毒液要淹沒吸管),經12d后取出,浸入2肥皂粉液中12h(或煮沸)取出,再用一根橡皮管,使一端接于自來水龍頭,另一端與吸管口相接,用自來水反復沖洗 ,最后用蒸餾水沖洗。 (6)如遇玻璃器皿用上述方法不能洗凈者,可用下列清洗液浸泡后洗刷。 重鉻酸鉀(工業(yè)用)80g,粗硫酸100ml,水1000ml。,(1)培養(yǎng)皿 將合適的底蓋配對,用報紙6個一摞包成一包,裝入金屬盒內。 (2)試管、三角燒瓶等
4、 塞上大小適合的棉塞或紗布塞(也可用各種型號的軟木塞),并在棉塞、瓶口之外,包以牛皮紙,用細繩扎緊即可。 (3)吸管 用35cm寬的長紙條(舊報紙、牛皮紙等),由尖端纏卷包裹,直至包沒吸管將紙條合攏。 (4)乳缽、漏斗、燒杯等 可用紙張直接包扎或用厚紙包嚴開口處,再以牛皮紙包扎。,2玻璃器皿的包裝,常用干熱滅菌法 將包裝的玻璃器皿放入干燥箱內,為使空氣流通,堆放不宜太擠,也不能緊貼箱壁,以免燒焦。一般160,維持2h。 滅菌完畢,關閉電源待箱中溫度下降至60以下,開箱取出玻璃器皿。,3玻璃器皿的滅菌,(二)實驗室常用儀器的使用,1電熱恒溫培養(yǎng)箱 2電熱干燥箱 3高壓蒸氣滅菌器 4電冰
5、箱 5電動離心機 6電熱恒溫水浴箱,1電熱恒溫培養(yǎng)箱,電熱恒溫培養(yǎng)箱又稱溫箱, 主要由箱體、電熱絲、溫度調節(jié)器等構成。 溫箱主要用于細菌的培養(yǎng)、某些血清學試驗及有關器皿的干燥等,(1)電熱恒溫培養(yǎng)箱使用方法,插上電源插頭,開啟電源開關,綠色指示燈明亮,表明電源接通。 然后把溫控儀上的調節(jié)旋鈕旋至所需溫度刻度處,此時紅燈亮,箱內開始升溫,待紅綠指示燈交替發(fā)亮時,工作室內溫度達到設定狀態(tài),進入正常工作。 應注意,近幾年銷售的溫箱有的紅燈亮表示通電及恒溫,綠燈亮表示升溫。,(2)電熱恒溫培養(yǎng)箱使用注意事項,溫箱必須放置于干燥及平穩(wěn)處。 使用時,隨時注意溫度計的指示溫度是否與所需溫度相同。 除了取放培
6、養(yǎng)物開啟箱門外,盡量減少開啟次數(shù),以免影響恒溫。 工作室內隔板放置試驗材料不宜過重、過密,以防影響熱空氣對流。底板為散熱板,其上切勿直接放置物品。 培養(yǎng)箱內禁止放入易揮發(fā)性物品,以免發(fā)生爆炸。,2電熱干燥箱,電熱干燥箱又稱干熱滅菌箱,其構造和使用方法與溫箱相似,但所用溫度較高。 主要用于玻璃器皿和金屬制品的干熱滅菌。 滅菌時箱內放置物品要留空隙,保持熱空氣流動,以利徹底滅菌。常用滅菌溫度160,維持2 h。滅菌時,關門加熱應開啟箱頂上的活塞通氣孔,使冷空氣排出,待升至60時,將活塞關閉,為了避免玻璃器皿炸裂,滅菌后箱內溫度降至60時,才能開啟箱門取物品。若僅需達到干燥目的,可一直開啟活塞通氣孔
7、,溫度只需60左右即可。 滅菌過程中如遇溫度突然升高,箱內冒煙,應立即切斷電源,關閉排氣小孔,箱門四周用濕毛巾堵塞,杜絕氧氣進入,火則自熄。,3高壓蒸氣滅菌器,高壓蒸氣滅菌器是應用最廣、效率最高的滅菌器,有手提式、立式、橫臥式三種,其構造和工作原理基本相同。 高壓蒸氣滅菌器為一鍋爐狀的雙層金屬圓筒,外筒盛水,內筒有一活動金屬隔板,隔板有許多小孔,使蒸氣流通。滅菌器上方或前方有金屬厚蓋,蓋上有壓力表、安全閥和放氣閥。蓋的邊緣附有螺旋,借以緊閉滅菌器,使蒸氣不能外溢。 在標準大氣壓下,水的沸點是100,這個溫度能殺死一般細菌的繁殖體,要殺死芽胞則需要很長時間。如果人為地加大壓力,則水的沸點可
8、以升高。因高壓蒸氣滅菌器是一個密閉的容器,加熱時蒸氣不能外溢,所以鍋內壓力不斷增大,使水的沸點超過121。,(1)高壓蒸氣滅菌器使用方法,加適量水于滅菌器外筒內,使水面略低于支架,將滅菌物品包扎好放入內筒篩板上。 器蓋蓋上時,必須將器蓋腹側的放氣軟管插入消毒內筒的管架中,然后對稱扭緊六個螺栓; 檢查安全閥、放氣閥,并使安全閥關閉,放氣閥打開。 通電后,待水蒸氣從放氣閥均勻冒出時,表示鍋內冷空氣已排盡,然后關閉放氣閥繼續(xù)加熱,待滅菌器內壓力升至約1105Pa(121.3),開始計時,維持2030min(通過控制電源維持),即可達到滅菌的目的。 滅菌完畢,停止加熱,待壓力自動降至零時才能開蓋取物。
9、 手提式高壓蒸氣滅菌器滅菌之后,可放出器內的水,并擦干凈。,高壓蒸氣滅菌器使用方法視頻,(2)高壓蒸氣滅菌器使用注意事項,螺栓必須對稱均勻旋緊,以免漏氣。 內筒中的滅菌物品,不可堆壓過緊,以免妨礙蒸氣流通,影響滅菌效果。 凡能耐熱和潮濕的物品,如培養(yǎng)基、生理鹽水、敷料、病原微生物等都可應用此法滅菌。 為了達到徹底滅菌的目的,滅菌時間和壓力必須準確可靠,操作人員不能擅自離開。 注意安全,在高壓滅菌密封液體時,如果壓力驟降,可能造成物品內外壓力不平衡而炸裂或液體噴出。,4電冰箱,電冰箱主要由箱體、制冷系統(tǒng)、自動控制系統(tǒng)和附件四大部分構成。 實驗室中常用以保存培養(yǎng)基、藥敏片、病料以及菌種、疫苗、診斷
10、液等生物制品。,電冰箱使用方法及注意事項,(1)電冰箱應放置在干燥通風處,避免日光照射,遠離熱源,離墻10cm以上,以保證對流,利于散熱。 (2)電冰箱電源的電壓一般為220V,如不符合,須另裝穩(wěn)壓器穩(wěn)壓。 (3)通電檢查箱內照明燈是否明亮,機器是否運轉。 (4)使用時將溫度調節(jié)器調至一定刻度(冷凍室0以下,冷藏室溫度410)。調節(jié)溫度時不可一次調得過低,以免凍壞箱內物品。應作第二次、第三次調整。 (5)冷凍室冰霜較厚時,按化霜按鈕或切斷電路,進行化霜,融化后清潔整理。 (6)箱內存放物品不宜過擠,以利冷空氣對流,使箱內溫度均勻。 (7)箱內保持清潔干燥,如有霉菌生長,斷電后取出物品,經福爾馬
11、林熏蒸消毒后,方可使用。,5電動離心機,實驗室常用電動離心機沉淀細菌、血細胞、蟲卵和分離血清等,較多用的低速離心機轉速可達4000r/min。 常用傾角電動離心機,其中管孔有一定傾斜角度,使沉淀物迅速下沉。 上口有蓋,確保安全,前下方裝有電源開關和速度調節(jié)器,可以調節(jié)轉速。,電動離心機使用方法及注意事項,(1)先將盛有材料的兩個離心管及套管放天平上配平,然后對稱放入離心機中,若分離材料為一管,則對側離心管放入等量的其他液體。 (2)將蓋蓋好,接通電路,慢慢旋轉速度調節(jié)器到所需刻度,保持一定的速度,達到所需的時間(一般轉速2000r/min,維持320min),將調節(jié)器慢慢旋回“0”處,停止轉動
12、方可揭蓋取出離心管。,6電熱恒溫水浴箱,為鍍鎳的銅或不銹鋼制成的水浴箱,加熱快耗電省,箱前有“電源”和“加熱”指示燈(一紅一綠),并裝有溫度調節(jié)器,自37100可以調節(jié)定溫,箱側有一水籠頭,供放水用。 水浴箱主要用于蒸餾、干燥、濃縮、溫漬化學藥品及血清學試驗用。,使用時必須先加水于箱內,通電后電源指示燈(綠燈)即亮,再順時針方向旋轉溫度調節(jié)器,綠燈滅,使加熱指示燈(紅燈)亮,即接通內部電熱絲,使之加溫。 如水溫達到所需溫度,再逆時針方向微微調節(jié)溫度調節(jié)器,使紅綠指示燈忽亮忽滅,經3060min觀察,水溫恒定不變即達到定溫。 如下次使用需要同樣溫度,可不必旋轉調節(jié)旋鈕,或記下所需刻度,以作下次轉向之用。 使用時,不可加水過多,以浸過加熱容器為宜。加水少于最低水位,則箱旁焊錫溶化引起漏水。 使用完畢,待水冷卻后,必須放水擦干。,電熱恒溫水浴箱使用方法及注意事項,課后作業(yè),1.寫出實習報告,