高二生物《DNA重組技術(shù)的基本工具》.ppt
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1、湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 DNA重組技術(shù)的基本工具 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 據(jù)有關(guān)資料統(tǒng)計, 全世界被調(diào)查的 2億人 口中每年有近 4百萬人 被狗或者其他動物咬傷, 全球每年因狂犬病導(dǎo)致 的死亡人數(shù)約 6萬人。 狂犬病列法定報告?zhèn)魅?病死亡數(shù)之首。 發(fā)病死 亡率近 100% 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 煙草 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 煙草 能產(chǎn)生狂犬病 抗體蛋白的轉(zhuǎn) 基因 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 研究人員評估表明糖尿病死亡率現(xiàn)已 居全世界疾病死亡率之首
2、。目前中國糖尿 病患者人數(shù)已居世界第二位,預(yù)計二二 五年時更將達(dá)五千九百三十萬人。 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 研究人員評估表明糖尿病死亡率現(xiàn)已 居全世界疾病死亡率之首。目前中國糖尿 病患者人數(shù)已居世界第二位,預(yù)計二二 五年時更將達(dá)五千九百三十萬人。 治療糖尿病特效藥 胰島素 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 研究人員評估表明糖尿病死亡率現(xiàn)已 居全世界疾病死亡率之首。目前中國糖尿 病患者人數(shù)已居世界第二位,預(yù)計二二 五年時更將達(dá)五千九百三十萬人。 治療糖尿病特效藥 胰島素 每 100kg 豬或牛的胰腺中僅可提取 45g。 湖南長郡
3、衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 1979年,美國將 人的胰島素基因 重組 到 大腸桿菌 內(nèi),實現(xiàn)了細(xì)菌生產(chǎn)胰島素, 大大降低了生產(chǎn)成本。 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 1979年,美國將 人的胰島素基因 重組 到 大腸桿菌 內(nèi),實現(xiàn)了細(xì)菌生產(chǎn)胰島素, 大大降低了生產(chǎn)成本。 思考: 轉(zhuǎn)基因技術(shù) 實現(xiàn)了 一種生物 的某些 性狀 在 另一種生物 中 表達(dá) 。這些 性狀的表達(dá)與我們學(xué)過的基因的什么過 程有關(guān)? 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 DNA(基因 ) mRNA 蛋白質(zhì) (性狀 ) 轉(zhuǎn)錄 翻譯 1979年,美國將
4、人的胰島素基因 重組 到 大腸桿菌 內(nèi),實現(xiàn)了細(xì)菌生產(chǎn)胰島素, 大大降低了生產(chǎn)成本。 思考: 轉(zhuǎn)基因技術(shù) 實現(xiàn)了 一種生物 的某些 性狀 在 另一種生物 中 表達(dá) 。這些 性狀的表達(dá)與我們學(xué)過的基因的什么過 程有關(guān)? 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 密碼子在生物界是 的! DNA(基因 ) mRNA 蛋白質(zhì) (性狀 ) 通用 1979年,美國將 人的胰島素基因 重組 到 大腸桿菌 內(nèi),實現(xiàn)了細(xì)菌生產(chǎn)胰島素, 大大降低了生產(chǎn)成本。 思考: 轉(zhuǎn)基因技術(shù) 實現(xiàn)了 一種生物 的某些 性狀 在 另一種生物 中 表達(dá) 。這些 性狀的表達(dá)與我們學(xué)過的基因的什
5、么過 程有關(guān)? 轉(zhuǎn)錄 翻譯 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 問題探討 蘇云金桿菌 毒蛋白 蘇云金桿菌含有一種可以合成毒蛋白 的基因。 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 問題探討 蘇云金桿菌 毒蛋白 普通棉花 抗蟲棉 蘇云金桿菌含有一種可以合成毒蛋白 的基因。 讓細(xì)菌的毒蛋白基因在棉花細(xì)胞中表 達(dá),可培育出抵抗棉鈴蟲害的抗蟲棉。 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 想一想需要做哪些關(guān)鍵工作? 蘇云金桿菌細(xì)胞 毒蛋白基因 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 想一想需要做哪些關(guān)鍵工作? 蘇云金桿菌
6、細(xì)胞 毒蛋白基因 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 想一想需要做哪些關(guān)鍵工作? 蘇云金桿菌細(xì)胞 毒蛋白基因 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 想一想需要做哪些關(guān)鍵工作? 蘇云金桿菌細(xì)胞 毒蛋白基因 棉花細(xì)胞 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 想一想需要做哪些關(guān)鍵工作? 蘇云金桿菌細(xì)胞 毒蛋白基因 棉花細(xì)胞 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 想一想需要做哪些關(guān)鍵工作? 蘇云金桿菌細(xì)胞 毒蛋白基因 棉花細(xì)胞 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 限制性核酸內(nèi)切酶 能識別雙鏈 D
7、NA分子的某種特定的核苷酸序列 , 并在使每一條鏈中 特定部位的兩個 核苷酸之間的磷酸二酯鍵 斷開。 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 A T G G C A T C T T C G A A 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 磷酸二酯鍵 即脫氧核糖、 磷酸之間的 連接 A T G G C A T C T T C G A A 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 磷酸二酯鍵 即脫氧核糖、 磷酸之間的 連接 A T G G C A T C T T C G A A 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 磷酸二酯鍵 即脫氧
8、核糖、 磷酸之間的 連接 A T G G C A T C T T C G A A 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 EcoR 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 EcoR 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 EcoR 黏性末端 黏性末端 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 Sma 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 200
9、8年下學(xué)期 制作 03 Sma 平末端 平末端 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 原核生物 4000種 1. 主要來源: 2. 種類: 3. 作用特點: 4. 作用結(jié)果: 一、限制性核酸內(nèi)切酶 “ 分子手術(shù)刀 ” 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 識別 特定核苷酸序列, 切斷 磷酸二酯鍵。具特 異性。 原核生物 4000種 1. 主要來源: 2. 種類: 3. 作用特點: 4. 作用結(jié)果: 一、限制性核酸內(nèi)切酶 “ 分子手術(shù)刀 ” 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 識別 特定核苷酸序列
10、, 切斷 磷酸二酯鍵。具特 異性。 原核生物 產(chǎn)生黏性末端或平末端 4000種 1. 主要來源: 2. 種類: 3. 作用特點: 4. 作用結(jié)果: 一、限制性核酸內(nèi)切酶 “ 分子手術(shù)刀 ” 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 要想獲得某個特定性狀的基因必須 要用限制酶切幾個切口?可產(chǎn)生幾個末 端? 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 要想獲得某個特定性狀的基因必須 要用限制酶切幾個切口?可產(chǎn)生幾個末 端? 要切兩個切口,產(chǎn)生四個末端。 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 要想獲得某個特定性
11、狀的基因必須 要用限制酶切幾個切口?可產(chǎn)生幾個末 端? 要切兩個切口,產(chǎn)生四個末端。 如果把兩種來源不同的 DNA用同一 種限制酶來切割,會怎樣呢? 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 要想獲得某個特定性狀的基因必須 要用限制酶切幾個切口?可產(chǎn)生幾個末 端? 要切兩個切口,產(chǎn)生四個末端。 如果把兩種來源不同的 DNA用同一 種限制酶來切割,會怎樣呢? 會產(chǎn)生相同的末端。 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程
12、學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同種限制酶 切割 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同種限制酶 切割 湖
13、南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同種限制酶 切割 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C
14、T T A A A A T T C G 用同種限制酶 切割 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同種限制酶 切割 “分子縫合針” : DNA連接酶 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 分類: Ecoli DNA連接酶 T4 DNA連接酶 作用: 二、 “ 分子縫合針 ”
15、 DNA連接酶 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 Ecoli DNA連接酶 或 T4DNA連接酶 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 Ecoli DNA連接酶 或 T4DNA連接酶 可把黏性末端之間的 縫隙 “ 縫合 ” 起來, 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 Ecoli DNA連接酶 或 T4DNA連接酶 可把黏性末端之間的 縫隙 “ 縫合 ” 起來, 即 恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間 的磷酸二酯鍵 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03
16、T4 DNA連接酶 還可把平末端之間的縫 隙 “ 縫合 ” 起來,但效率較低 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 DNA連接酶與 DNA聚合酶是一回 事嗎?為什么? 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 DNA連接酶與 DNA聚合酶是一回 事嗎?為什么? 不是一回事。 相同點 :形成磷酸二酯鍵 不同點 : 1) DNA聚合酶只能將單個核 苷酸加到已有的核酸片段上,形成磷酸 二酯鍵;而 DNA連接酶是在兩個 DNA片 段之間形成磷酸二酯鍵 2) DNA聚合酶需要以一條 DNA鏈為模 板;而 DNA連接酶不需要模板。 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年
17、下學(xué)期 制作 03 棉花的 一段 DNA 含毒蛋白 基因的細(xì) 菌 DNA片 段 模擬制作: 用剪刀在特定部位對棉花 DNA進(jìn)行 模擬切割,并將模擬毒蛋白基因取出, 再用膠紙模擬基因種間連接。 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 三、 “ 分子運輸車 ” 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體 載體需要的條件: 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 三、 “ 分子運輸車 ” 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體 載體需要的條件: 作為分子運輸車 載體,如果沒有 切割位點將會怎樣? 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 三、 “ 分子運輸車 ”
18、 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體 載體需要的條件: 有 1多個限制酶切點 作為分子運輸車 載體,如果沒有 切割位點將會怎樣? 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 三、 “ 分子運輸車 ” 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體 載體需要的條件: 有 1多個限制酶切點 作為分子運輸車 載體,如果沒有 切割位點將會怎樣? 霍亂菌的質(zhì)粒多個限制酶切點,你會 用它來做分子運輸車嗎? 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 三、 “ 分子運輸車 ” 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體 載體需要的條件: 有 1多個限制酶切點 對受體細(xì)胞無害 作為
19、分子運輸車 載體,如果沒有 切割位點將會怎樣? 霍亂菌的質(zhì)粒多個限制酶切點,你會 用它來做分子運輸車嗎? 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 假如目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不能復(fù) 制或不能轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)基因生物能有預(yù)想的效 果嗎? 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 導(dǎo)入基因 能在受體細(xì)胞中復(fù)制、表達(dá) 假如目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不能復(fù) 制或不能轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)基因生物能有預(yù)想的效 果嗎? 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 導(dǎo)入基因 能在受體細(xì)胞中復(fù)制、表達(dá) 假如目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不能復(fù) 制或不能轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)基因生物能有預(yù)想的效 果嗎?
20、 目的基因有沒有進(jìn)入受體細(xì)胞,如 何去發(fā)現(xiàn)? 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 導(dǎo)入基因 能在受體細(xì)胞中復(fù)制、表達(dá) 有某些標(biāo)記基因,便于篩選 假如目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不能復(fù) 制或不能轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)基因生物能有預(yù)想的效 果嗎? 目的基因有沒有進(jìn)入受體細(xì)胞,如 何去發(fā)現(xiàn)? 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 常用運載體: 細(xì)菌的質(zhì)粒 噬菌體或某些動植物病毒 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 質(zhì)粒的特點 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 質(zhì)粒的特點 1.細(xì)胞染色體 (或擬核 DNA分子 )
21、 外能自主復(fù)制的 小型環(huán)狀 DNA 分子; 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 質(zhì)粒的特點 1.細(xì)胞染色體 (或擬核 DNA分子 ) 外能自主復(fù)制的 小型環(huán)狀 DNA 分子; 2.質(zhì)粒的存在對宿 主細(xì)胞無影響; 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 質(zhì)粒的特點 1.細(xì)胞染色體 (或擬核 DNA分子 ) 外能自主復(fù)制的 小型環(huán)狀 DNA 分子; 2.質(zhì)粒的存在對宿 主細(xì)胞無影響; 3.質(zhì)粒的復(fù)制只能 在宿主細(xì)胞內(nèi)完 成。 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 1.以下說法正確的是 ( ) A. 所有的限制酶只能識別一種特定 的核
22、苷酸序列 B. 質(zhì)粒是基因工程中唯一的運載體 C. 運載體必須具備的條件之一是: 具有多個限制酶切點,以便與外源基因 連接 D. DNA連接酶使黏性末段的堿基 之間形成氫鍵 練習(xí) 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 1.以下說法正確的是 ( ) A. 所有的限制酶只能識別一種特定 的核苷酸序列 B. 質(zhì)粒是基因工程中唯一的運載體 C. 運載體必須具備的條件之一是: 具有多個限制酶切點,以便與外源基因 連接 D. DNA連接酶使黏性末段的堿基 之間形成氫鍵 C 練習(xí) 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 2. 不屬于質(zhì)粒
23、被選為基因運載體的 理由是 ( ) A. 能復(fù)制 B. 有多個限制酶切點 C. 具有標(biāo)記基因 D. 它是環(huán)狀 DNA 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 2. 不屬于質(zhì)粒被選為基因運載體的 理由是 ( ) A. 能復(fù)制 B. 有多個限制酶切點 C. 具有標(biāo)記基因 D. 它是環(huán)狀 DNA D 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 3.有關(guān)基因工程的敘述中,錯誤的是 ( ) A. 基因工程技術(shù)能定向地改造生物的 遺傳性狀,培育生物新品種 B. 重
24、組 DNA的形成在細(xì)胞內(nèi)完成 C. 目的基因須由運載體導(dǎo)入受體細(xì)胞 D. 質(zhì)粒都可作為運載體 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 3.有關(guān)基因工程的敘述中,錯誤的是 ( ) A. 基因工程技術(shù)能定向地改造生物的 遺傳性狀,培育生物新品種 B. 重組 DNA的形成在細(xì)胞內(nèi)完成 C. 目的基因須由運載體導(dǎo)入受體細(xì)胞 D. 質(zhì)粒都可作為運載體 B D 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 4.下列四條 DNA分子,彼此間具有粘 性末端的一組是 ( ) A. B. C. D. 湖南長郡衛(wèi)星遠(yuǎn)程學(xué)校 2008年下學(xué)期 制作 03 4.下列四條 DNA分子,彼此間具有粘 性末端的一組是 ( ) A. B. C. D. D
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