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1、生物選修生物選修3 3（人教版）（人教版）1課資參照專題專題1 基因工程基因工程1.2 基因工程的基本操作基因工程的基本操作程序程序2課資參照3課資參照4課資參照5課資參照6課資參照7課資參照8課資參照9課資參照10課資參照11課資參照12課資參照13課資參照14課資參照15課資參照16課資參照17課資參照18課資參照19課資參照20課資參照比較比較DNA復制復制PCR技術技術區(qū)區(qū)別別解旋解旋方式方式解旋酶催化解旋酶催化DNA在高溫作用在高溫作用下變性解旋下變性解旋場所場所細胞內(nèi)細胞內(nèi)(主要在主要在細胞核內(nèi)細胞核內(nèi))細胞外細胞外(主要在主要在PCR擴增儀內(nèi)擴增儀內(nèi))21課資參照區(qū)區(qū)別別酶酶DN
2、A解旋酶、普通解旋酶、普通的的DNA聚合酶等聚合酶等耐熱的耐熱的DNA聚合酶聚合酶(Taq聚合酶聚合酶)溫度溫度條件條件細胞內(nèi)溫和條件細胞內(nèi)溫和條件需控制溫度，在較需控制溫度，在較高溫度下進行高溫度下進行合成合成的的對象對象DNA分子分子DNA片段或基因片段或基因聯(lián)系聯(lián)系模板：均需要脫氧核苷酸鏈作為模板模板：均需要脫氧核苷酸鏈作為模板進行物質(zhì)合成進行物質(zhì)合成原料：均為四種脫氧核苷酸原料：均為四種脫氧核苷酸酶：均需要酶：均需要DNA聚合酶進行催化聚合酶進行催化引物：均需要引物，使引物：均需要引物，使DNA聚合酶從聚合酶從引物的引物的3端開始連接脫氧核苷酸端開始連接脫氧核苷酸22課資參照23課資參
3、照24課資參照25課資參照26課資參照27課資參照28課資參照29課資參照30課資參照31課資參照受體細胞受體細胞方法方法植物細胞植物細胞(體細胞體細胞)農(nóng)桿菌轉化法：目的基因插入農(nóng)桿菌轉化法：目的基因插入Ti質(zhì)質(zhì)粒的粒的T-DNA農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌導入植物細胞導入植物細胞穩(wěn)定維持和表達穩(wěn)定維持和表達基因槍法：是單子葉植物中常用的基因槍法：是單子葉植物中常用的一種基因轉化方法，但是成本較高一種基因轉化方法，但是成本較高花粉管通道法：這是我國科學家獨花粉管通道法：這是我國科學家獨創(chuàng)的一種方法，是一種十分簡便經(jīng)濟創(chuàng)的一種方法，是一種十分簡便經(jīng)濟的方法的方法32課資參照動物細胞動物細胞(受精卵受精卵)顯微
4、注射法：含有目的基顯微注射法：含有目的基因的表達載體提純因的表達載體提純?nèi)÷讶÷?受精卵受精卵)顯微注射顯微注射受精受精卵發(fā)育卵發(fā)育獲得具有新性狀獲得具有新性狀的動物的動物微生物細胞微生物細胞(原核細胞原核細胞)Ca2處理細胞處理細胞感受態(tài)細感受態(tài)細胞胞表達載體與感受態(tài)細表達載體與感受態(tài)細胞混合胞混合感受態(tài)細胞吸收感受態(tài)細胞吸收DNA分子分子目的基因隨受目的基因隨受體細胞的繁殖而復制體細胞的繁殖而復制33課資參照34課資參照35課資參照36課資參照37課資參照38課資參照39課資參照40課資參照41課資參照42課資參照43課資參照44課資參照比較比較起始起始(終止終止)密碼子密碼子啟動啟動(終
5、止終止)子子本質(zhì)本質(zhì)三個相鄰堿基三個相鄰堿基DNA片段片段位置位置位于位于mRNA上上位于位于DNA上上作用作用啟動啟動(終止終止)翻譯翻譯啟動啟動(終止終止)轉錄轉錄45課資參照46課資參照47課資參照類型類型步驟步驟檢測內(nèi)容檢測內(nèi)容方法方法結果顯示結果顯示分子分子水平水平檢測檢測第一步第一步目的基因是目的基因是否進入受體否進入受體細胞細胞DNA分分子雜交子雜交(DNA和和DNA之之間間)是否成功是否成功顯示出雜顯示出雜交帶交帶第二步第二步目的基因是目的基因是否轉錄出否轉錄出mRNA分子雜交分子雜交技術技術(DNA和和mRNA之之間間)是否成功是否成功顯示出雜顯示出雜交帶交帶第三步第三步目的
6、基因是目的基因是否翻譯出蛋否翻譯出蛋白質(zhì)白質(zhì)抗原抗原抗抗體雜交體雜交是否成功是否成功顯示出雜顯示出雜交帶交帶48課資參照個個體體水水平平鑒鑒定定需要做抗蟲、抗病的接種實驗，以確定需要做抗蟲、抗病的接種實驗，以確定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程是否有抗性以及抗性的程度；基因工程產(chǎn)品與天然產(chǎn)品的功能進行活性比較，產(chǎn)品與天然產(chǎn)品的功能進行活性比較，以確定二者的功能活性是否相同等以確定二者的功能活性是否相同等49課資參照50課資參照51課資參照52課資參照53課資參照54課資參照55課資參照56課資參照57課資參照58課資參照59課資參照60課資參照61課資參照62課資參照63課資參照64課資參照65課資參照
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