《生物《DNA的粗提取與鑒定》教案(新人教版選修1)高二》由會員分享,可在線閱讀,更多相關《生物《DNA的粗提取與鑒定》教案(新人教版選修1)高二(4頁珍藏版)》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。
1、DNA的粗提取與鑒定
教學目標:
1、知識與能力目標
理解DNA勺理化特性及根據(jù)其理化特性而提取和鑒定的原理,初步掌握DNA勺粗提取和鑒定
方法,理解相關溶液的作用機理,培養(yǎng)學生的分析能力,通過實驗使學生能夠簡述科學探究 的基本過程。
2、情感態(tài)度與價值目標
通過探索培養(yǎng)科學的懷疑精神和創(chuàng)新精神;通過實驗結(jié)果,學生樹立生命物質(zhì)性的觀點。
教學重點:提取DNA勺相關原理和步驟
教學難點:提取DNA勺相關原理和步驟
教學過程:
開門見山:
講解本實驗的目的是提取 DN解口 DNA勺鑒定,其中提取 DNA是本實驗的重點和難點。
提出問題:“ DNAfe要存在于什么結(jié)構(gòu)上? ”
2、 “如何提取DNA ” “選什么材料好?”
達成共識:
1、造適宜材料:選動物細胞,易打破細胞結(jié)構(gòu)
2、破壞細胞膜、核膜結(jié)構(gòu),得核物質(zhì)。
3、將DNAW蛋白質(zhì)等物質(zhì)分開,得 DNA
4、去掉 DNA中雜質(zhì),提純 DNA
探究實驗原理:
屏幕展示表格1
NaCl2mo1/L
NaC10.14mo1/L
NaC10.015mo1/L
DNA
蛋白質(zhì)
表格2
DNA
蛋白質(zhì)
雜質(zhì)
95%酉精
不同濃度的NaC1溶液可溶解或析出 DNA 95%g精可提取 DNA
填表1 :
NaCl2mo1/L
3、NaC10.4mo1/L
NaC10.015mo1/L
DNA
取大
最小
變大
蛋白質(zhì)
解聚
取大
變小
填表2:
DNA
蛋白質(zhì)
雜質(zhì)
95%酉精
不溶
可溶
可溶
通過對實驗原理的預習,表格的比較,使學,生明確了各溶液的用途,保證理解實驗。
請學生代表簡述DN砥取實驗步驟
投影展示實驗設計思路:
雞血細胞液①aDNA釋放②bDNAf蛋白質(zhì)的分離 ③cDN麗出④dDNAfet (提純)
獲得雞血細胞核物質(zhì):提核物質(zhì)一溶解一析出一溶解一析出
實驗步驟:
方法步驟
加入物質(zhì)
目的
1.制備雞血細胞
檸檬酸衲溶液
①
2
4、.提取雞血細胞的細胞核物 質(zhì)
20 mL蒸圈水
②
3,溶解細胞核內(nèi)的DNA
2 mol/L 的 NaCl 溶液 40 mL
③
4.析出含DNA的黏稠物
蒸僵水
5,港取含DNA的黏稠物
_ .-~
⑤
亂將DNA的黏稠物再溶解
2 moVL 的 NaCl 溶液 2D mL
7,過港含DNA的NaCl溶液
亂提取含有雜質(zhì)較少的DNA
冷卻的95%的酒精50 mL
工DNA的鑒定
A(1)向試管中加入0,015 mul/L的
溶液5 mL
C2)加入DNA
C3)加入4 mL二基胺試劑
B; (1)向前管中加入0.015 mol/L
5、的NaCl
溶液5 mL
(2)加入4 mL二年胺試劑
引導學生討論、回憶并回答目的① 逆。
①防止血凝。
②加速血細胞破裂。
③溶解DNA
④使2 mol/L的NaCl溶液稀釋至
0.14 mol/L,促DNAt大限度地析出。
⑤使含DNA的黏稠物被留在紗布上。
⑥使含DNA的黏稠物盡可能多地溶于溶液中。
⑦除去含DNA的濾液中的雜質(zhì)。
⑧提取DNA
⑨A:出現(xiàn)藍色。B:無變化
討論與結(jié)論:
投影給出如下討論提綱,供學生討論。
(1) DNA?提取過程中的關鍵是哪幾步?
(2)提取雞血中的DNA寸,為什么要除去血液中的上清液?
(3)
6、DNA勺直徑約為2 nm,實驗中出現(xiàn)的絲狀物的粗細是否表示一個DN冊子直徑的大小?
學生分組進行討論并發(fā)表討論結(jié)果。教師對討論進行全程指導,并與學生一起歸納總結(jié)。
(1) a.提取雞血細胞的核物質(zhì)。應用低滲原理和機械攪拌,可得到最大量的DNA
b.析出DNAa稠物。加蒸儲水要慢,攪拌要輕。
c.沉淀DNAM,必須用冷酒精。
(2)提取DNA去除雜質(zhì)是關鍵。由于上清液是血液中的血漿部分,不含DNA所以要除去
(含蛋白質(zhì))。
(3)實驗中出現(xiàn)的絲狀物是肉眼可以觀察到的,這種絲狀物的直徑要比DNA分子的直徑2 nm
大許多倍,所以實驗中出現(xiàn)的絲狀物并不表示一個DN冊子 的直徑。
實
7、驗結(jié)論:細胞中有 DNA DNAM二苯胺試劑在沸水浴中變藍色。
教學目標鞏固
1 .實驗中步驟1和步驟3都需要加入蒸儲水,兩次加入的作用相同嗎?為什么?
2 .實驗中NaCl的物質(zhì)的量濃度為 2 mol/L和0.14 mol/L 對DNAW■何影響?
3 . DNAM二苯胺(沸水?。境?A .磚紅色 B.橘黃色 C.紫色D .藍色
補充知識:
1、鑒定DNA勺其他方法
用紫外燈照射法鑒定 DN?果很好。具體鑒定方法如下。
1 .配制染色劑。用蒸儲水配制萬分之五的澳化乙錠(EB)溶液。
2 .將玻璃棒上纏繞的白色絮狀物抹于蠟紙上,再滴一滴EB溶液染色。
3 .將蠟紙放在紫
8、外燈(260 nm)下照射(暗室中),可見橙紅色的螢光(DNA的紫外吸收高峰 在 280 nm 處)。
2、DNA粗提取與鑒定的另一種 方法
1 .材料用具
新鮮菜花(或蒜黃、菠菜)。
塑料燒杯,量筒,玻璃棒,尼龍紗布,陶瓷研缽,試管,試管架,試管夾,漏斗,酒精燈,
石棉網(wǎng),三角架,火柴,刀片,天平。
研磨液,體積分數(shù)為 95%勺酒精溶液,二苯胺試劑,蒸儲水。
2 .方法步驟
A. DNA勺粗提取
(1)準備材料:將 新鮮菜花和體積分數(shù)為 95%勺酒精溶液放入冰存f冷凍室,至少 24小時。
(2)取材:稱取30 g菜花,去梗取花,切碎。
(3)研磨:將碎菜花放入研缽中,倒
9、入10 mL研磨液,充分研磨 10 min。
(4)過濾:在漏斗中墊上尼龍紗布,將菜花研磨液濾入燒杯中(有條件的學??蓪V液倒入
塑料離心管中進行離心,用1000 r/min 的旋轉(zhuǎn)頻率,離心 2~5 min;取上清液放入燒杯.中)。
在4c冰箱中放置 幾分鐘后,再取上清液。
(5)加冷酒精:將一倍體積的上清液倒入兩倍體積的體積分數(shù)為95%勺酒精溶液中,并且玻
璃棒緩緩地輕輕攪拌溶液(玻璃棒不要直插燒杯底部)。沉淀3~5 min后,可見白色的 DNA絮
狀物出現(xiàn)。用玻璃棒緩緩 旋轉(zhuǎn),絮狀物會纏在玻璃棒上。
B. DNA勺鑒定
(1)配制二苯胺試劑:取 0.1 mL B液;滴入到10 mL A液中,混勻。
(2)鑒定:取4 mLDN碾取液放入試管中,加入 4 mL二苯胺試劑,混勻后觀察溶液顏色(不 變藍)。用沸水浴(100C)加熱10 min。在加熱過程中,隨時注意試管中溶液顏色的變化(逐 漸出現(xiàn)淺藍色)。
結(jié)課:這節(jié)課咱們驗證了細胞是由化合物按照一定的方式組成的這一結(jié)論。從知識結(jié)構(gòu)角度
來說,一要加深對生物的物質(zhì)性理解;二要掌握一般的物質(zhì)提取方法;三要注意不同的化學
物質(zhì)要用不同的原理鑒定。從實驗過程角度來說,要理解各種溶液和試劑的作用和目的。