（浙江專版）2017-2018學(xué)年高中生物 課時(shí)跟蹤檢測（一）大腸桿菌的培養(yǎng)和分離（含解析）浙科版選修1

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1、課時(shí)跟蹤檢測（一） 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離 1．下列有關(guān)微生物培養(yǎng)條件的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．分離微生物常用固體培養(yǎng)基，擴(kuò)大培養(yǎng)常用液體培養(yǎng)基 B．“細(xì)菌喜葷，霉菌喜素”，培養(yǎng)基中成分的含量和配比因培養(yǎng)物而異 C．培養(yǎng)基的滅菌均采用高壓蒸汽法 D．制作固體培養(yǎng)基時(shí)常常加入瓊脂 解析：選C　培養(yǎng)基的滅菌通常是采用高壓蒸汽法，但因培養(yǎng)基的成分而異。如培養(yǎng)基中有葡萄糖，高壓蒸汽條件下會(huì)導(dǎo)致葡萄糖分解碳化，而采用500 g/cm2壓力滅菌30 min。 2．獲得純凈培養(yǎng)物的最關(guān)鍵環(huán)節(jié)是(　　) A．將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌 B．接種純種細(xì)菌 C．

2、適宜環(huán)境條件下培養(yǎng) D．防止外來雜菌的入侵 解析：選D　純凈培養(yǎng)物是單一、純種菌的菌落。因此，確保無其他雜菌的入侵是關(guān)鍵。 3．金黃色葡萄球菌有很強(qiáng)的致病力，常引起骨髓炎等，還可能引起食物中毒。下述有關(guān)接種金黃色葡萄球菌的實(shí)驗(yàn)敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．將灼燒的接種環(huán)伸入試管內(nèi)，先接觸長菌多的部位 B．取下棉塞后要將試管口灼燒滅菌 C．對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理 D．接種后還要將試管口滅菌加塞 解析：選A　接種環(huán)伸入試管后應(yīng)先接觸未長菌的部位，待接種環(huán)冷卻后再接觸長菌部位。 4．下列劃線分離的圖解中，正確的是(　　) 解析：選C　劃線分離的劃線有許多要求。A的劃線方法不對(duì)，而B

3、錯(cuò)在劃線2的起點(diǎn)，D項(xiàng)錯(cuò)在4與1交叉了。 5．要獲得遺傳特性單一的大腸桿菌菌種，一般必須對(duì)原有的大腸桿菌菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)、并利用純化技術(shù)得到單菌落。請(qǐng)回答下列有關(guān)大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實(shí)驗(yàn)的相關(guān)問題： (1)對(duì)買回來的大腸桿菌菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，一般用LB培養(yǎng)基，在培養(yǎng)基中為微生物提供碳源、氮源和能源的物質(zhì)主要是____________________，為調(diào)節(jié)滲透壓，要加入一定量的__________。為進(jìn)行大腸桿菌的分離，還要加入瓊脂配制成固體培養(yǎng)基，并進(jìn)行倒平板的操作。 (2)獲得純凈微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是____________________，為此，必須對(duì)培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基進(jìn)行

4、嚴(yán)格滅菌。培養(yǎng)器皿和培養(yǎng)基一般采用________法滅菌，接種環(huán)采用灼燒法滅菌。同時(shí)在接種或倒平板操作時(shí)，除了在超凈臺(tái)上進(jìn)行操作并對(duì)實(shí)驗(yàn)者的衣著、手和實(shí)驗(yàn)空間進(jìn)行嚴(yán)格清潔和消毒外，還必須_______________________________________以防止空氣中的雜菌污染。 (3)大腸桿菌菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)一般采用液體培養(yǎng)基，接種后將培養(yǎng)基置于37 ℃搖床振蕩條件下培養(yǎng)12小時(shí)。菌種的分離一般在固體培養(yǎng)基上采用____________法，并將培養(yǎng)皿以______狀態(tài)放置于適宜溫度的恒溫箱中，培養(yǎng)12～24小時(shí)后，____________________，接種于固體斜面培養(yǎng)基上，37

5、 ℃培養(yǎng)24小時(shí)后，得到的純化菌種在________條件下保存。 解析：(1)LB培養(yǎng)基的主要成分有蛋白胨、酵母提取物、氯化鈉、水、瓊脂，其中蛋白胨和酵母提取物為微生物提供碳源、氮源和能源，氯化鈉可以調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓，瓊脂作為凝固劑。(2)微生物純培養(yǎng)的關(guān)鍵是防止外來雜菌的污染，因此操作過程中要嚴(yán)格滅菌，培養(yǎng)器皿和培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌，而接種時(shí)要在酒精燈火焰旁進(jìn)行。(3)大腸桿菌菌種分離采用劃線分離法，接種后將培養(yǎng)皿置于恒溫箱中倒置培養(yǎng)，以防培養(yǎng)過程中被污染；培養(yǎng)后菌種的保藏方法是：用接種環(huán)將單菌落挑出，接種于斜面培養(yǎng)基上，37 ℃培養(yǎng)24小時(shí)后置于4 ℃條件下保存。 答案：

6、(1)蛋白胨和酵母提取物　氯化鈉 (2)防止外來雜菌的侵入　高壓蒸汽滅菌　保證操作過程在酒精燈火焰旁進(jìn)行 (3)劃線分離　倒置　將單菌落用接種環(huán)取出　4 ℃ 6．大腸桿菌是生存在人體腸道中的正常菌群，每克糞便中含有109個(gè)，且能夠與致病菌混雜生長。如果食品和飲用水中出現(xiàn)大腸桿菌，就意味著食物可能被糞便污染而帶上致病菌，因而常將大腸桿菌的數(shù)量作為食品衛(wèi)生的檢測指標(biāo)之一。請(qǐng)據(jù)此回答下列問題： (1)測定街邊出售的奶茶中大腸桿菌的數(shù)目，常用涂布分離法。該方法首先配制LB______培養(yǎng)基，進(jìn)行高壓蒸汽滅菌后冷卻至60 ℃，在__________旁倒在培養(yǎng)皿中形成平板；對(duì)奶茶樣品進(jìn)行一定倍數(shù)的

7、稀釋，取0.1 mL奶茶稀釋液，加在培養(yǎng)皿的固體培養(yǎng)基上，用______________涂布在培養(yǎng)基平面上，然后進(jìn)行培養(yǎng)；觀察統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)皿中______數(shù)目；該數(shù)據(jù)比實(shí)際數(shù)值要______(填“高”或“低”)，原因是_________________________________。實(shí)驗(yàn)完成后需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行________處理，然后才能倒掉。 (2)若要對(duì)上述培養(yǎng)基中的菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，則需配制LB________培養(yǎng)基，滅菌后，將________在酒精燈火焰上燒紅后冷卻，然后蘸取單菌落中的菌體接種到新的培養(yǎng)基中，在適宜環(huán)境中培養(yǎng)________h即可。 解析：(1)微生物的分離通常用固體

8、培養(yǎng)基。為防止雜菌污染，要在酒精燈火焰旁倒平板。在用涂布分離法分離細(xì)菌時(shí)，為了使細(xì)菌均勻涂布在固體培養(yǎng)基上，常用玻璃刮刀把菌液涂布在培養(yǎng)基上。通過觀察菌落數(shù)推算細(xì)菌數(shù)目。培養(yǎng)基中可能有兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌緊挨在一起，共同形成一個(gè)菌落，因此觀察到的菌落數(shù)可能比實(shí)際菌落數(shù)低。為了防止實(shí)驗(yàn)菌污染環(huán)境，實(shí)驗(yàn)完成后需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理，然后才能倒掉。(2)對(duì)微生物進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，通常使用LB液體培養(yǎng)基。一般用接種環(huán)轉(zhuǎn)移帶菌的培養(yǎng)物。接種時(shí)，先將接種環(huán)在酒精燈火焰上燒紅后冷卻，然后蘸取帶菌的培養(yǎng)物，放到新的培養(yǎng)基中。在液體培養(yǎng)基中，只要接種培養(yǎng)12 h，每毫升培養(yǎng)基中就有幾億個(gè)細(xì)菌。 答案：(1)固體　酒精

9、燈火焰　玻璃刮刀(涂布棒)　菌落　低　培養(yǎng)基中可能有兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌緊挨在一起，共同形成一個(gè)菌落　滅菌 (2)液體　接種環(huán)　12 7．據(jù)所學(xué)知識(shí)，回答下列問題： (1)菌落是由微生物在適宜_______培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長繁殖到一定程度，形成肉眼可見、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞的群體。適宜的培養(yǎng)基，除了含微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)以外，還要考慮_______、_______等。 (2)______________、______________這兩種分離方法都能使培養(yǎng)基的表面形成由__________形成的單個(gè)菌落，其中______________還可用于對(duì)菌液中的菌體進(jìn)行計(jì)數(shù)。 解析：微生物在液體培養(yǎng)基中能較快繁殖，但不能形成子細(xì)胞的集群。當(dāng)固體培養(yǎng)基表面接種的菌密度足夠低時(shí)，菌落就是從單個(gè)菌體分裂形成的。 答案：(1)固體　酸堿度　滲透壓　(2)劃線分離法　涂布分離法　單個(gè)菌體　涂布分離法 - 3 -