(浙江專版)2017-2018學年高中生物 課時跟蹤檢測(一)大腸桿菌的培養(yǎng)和分離(含解析)浙科版選修1

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1、課時跟蹤檢測(一) 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離 1.下列有關微生物培養(yǎng)條件的敘述,錯誤的是(  ) A.分離微生物常用固體培養(yǎng)基,擴大培養(yǎng)常用液體培養(yǎng)基 B.“細菌喜葷,霉菌喜素”,培養(yǎng)基中成分的含量和配比因培養(yǎng)物而異 C.培養(yǎng)基的滅菌均采用高壓蒸汽法 D.制作固體培養(yǎng)基時常常加入瓊脂 解析:選C 培養(yǎng)基的滅菌通常是采用高壓蒸汽法,但因培養(yǎng)基的成分而異。如培養(yǎng)基中有葡萄糖,高壓蒸汽條件下會導致葡萄糖分解碳化,而采用500 g/cm2壓力滅菌30 min。 2.獲得純凈培養(yǎng)物的最關鍵環(huán)節(jié)是(  ) A.將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌 B.接種純種細菌 C.

2、適宜環(huán)境條件下培養(yǎng) D.防止外來雜菌的入侵 解析:選D 純凈培養(yǎng)物是單一、純種菌的菌落。因此,確保無其他雜菌的入侵是關鍵。 3.金黃色葡萄球菌有很強的致病力,常引起骨髓炎等,還可能引起食物中毒。下述有關接種金黃色葡萄球菌的實驗敘述錯誤的是(  ) A.將灼燒的接種環(huán)伸入試管內,先接觸長菌多的部位 B.取下棉塞后要將試管口灼燒滅菌 C.對接種環(huán)進行灼燒處理 D.接種后還要將試管口滅菌加塞 解析:選A 接種環(huán)伸入試管后應先接觸未長菌的部位,待接種環(huán)冷卻后再接觸長菌部位。 4.下列劃線分離的圖解中,正確的是(  ) 解析:選C 劃線分離的劃線有許多要求。A的劃線方法不對,而B

3、錯在劃線2的起點,D項錯在4與1交叉了。 5.要獲得遺傳特性單一的大腸桿菌菌種,一般必須對原有的大腸桿菌菌種進行擴大培養(yǎng)、并利用純化技術得到單菌落。請回答下列有關大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實驗的相關問題: (1)對買回來的大腸桿菌菌種進行擴大培養(yǎng),一般用LB培養(yǎng)基,在培養(yǎng)基中為微生物提供碳源、氮源和能源的物質主要是____________________,為調節(jié)滲透壓,要加入一定量的__________。為進行大腸桿菌的分離,還要加入瓊脂配制成固體培養(yǎng)基,并進行倒平板的操作。 (2)獲得純凈微生物培養(yǎng)物的關鍵是____________________,為此,必須對培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基進行

4、嚴格滅菌。培養(yǎng)器皿和培養(yǎng)基一般采用________法滅菌,接種環(huán)采用灼燒法滅菌。同時在接種或倒平板操作時,除了在超凈臺上進行操作并對實驗者的衣著、手和實驗空間進行嚴格清潔和消毒外,還必須_______________________________________以防止空氣中的雜菌污染。 (3)大腸桿菌菌種的擴大培養(yǎng)一般采用液體培養(yǎng)基,接種后將培養(yǎng)基置于37 ℃搖床振蕩條件下培養(yǎng)12小時。菌種的分離一般在固體培養(yǎng)基上采用____________法,并將培養(yǎng)皿以______狀態(tài)放置于適宜溫度的恒溫箱中,培養(yǎng)12~24小時后,____________________,接種于固體斜面培養(yǎng)基上,37

5、 ℃培養(yǎng)24小時后,得到的純化菌種在________條件下保存。 解析:(1)LB培養(yǎng)基的主要成分有蛋白胨、酵母提取物、氯化鈉、水、瓊脂,其中蛋白胨和酵母提取物為微生物提供碳源、氮源和能源,氯化鈉可以調節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓,瓊脂作為凝固劑。(2)微生物純培養(yǎng)的關鍵是防止外來雜菌的污染,因此操作過程中要嚴格滅菌,培養(yǎng)器皿和培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌,而接種時要在酒精燈火焰旁進行。(3)大腸桿菌菌種分離采用劃線分離法,接種后將培養(yǎng)皿置于恒溫箱中倒置培養(yǎng),以防培養(yǎng)過程中被污染;培養(yǎng)后菌種的保藏方法是:用接種環(huán)將單菌落挑出,接種于斜面培養(yǎng)基上,37 ℃培養(yǎng)24小時后置于4 ℃條件下保存。 答案:

6、(1)蛋白胨和酵母提取物 氯化鈉 (2)防止外來雜菌的侵入 高壓蒸汽滅菌 保證操作過程在酒精燈火焰旁進行 (3)劃線分離 倒置 將單菌落用接種環(huán)取出 4 ℃ 6.大腸桿菌是生存在人體腸道中的正常菌群,每克糞便中含有109個,且能夠與致病菌混雜生長。如果食品和飲用水中出現(xiàn)大腸桿菌,就意味著食物可能被糞便污染而帶上致病菌,因而常將大腸桿菌的數(shù)量作為食品衛(wèi)生的檢測指標之一。請據(jù)此回答下列問題: (1)測定街邊出售的奶茶中大腸桿菌的數(shù)目,常用涂布分離法。該方法首先配制LB______培養(yǎng)基,進行高壓蒸汽滅菌后冷卻至60 ℃,在__________旁倒在培養(yǎng)皿中形成平板;對奶茶樣品進行一定倍數(shù)的

7、稀釋,取0.1 mL奶茶稀釋液,加在培養(yǎng)皿的固體培養(yǎng)基上,用______________涂布在培養(yǎng)基平面上,然后進行培養(yǎng);觀察統(tǒng)計培養(yǎng)皿中______數(shù)目;該數(shù)據(jù)比實際數(shù)值要______(填“高”或“低”),原因是_________________________________。實驗完成后需要對培養(yǎng)基進行________處理,然后才能倒掉。 (2)若要對上述培養(yǎng)基中的菌種進行擴大培養(yǎng),則需配制LB________培養(yǎng)基,滅菌后,將________在酒精燈火焰上燒紅后冷卻,然后蘸取單菌落中的菌體接種到新的培養(yǎng)基中,在適宜環(huán)境中培養(yǎng)________h即可。 解析:(1)微生物的分離通常用固體

8、培養(yǎng)基。為防止雜菌污染,要在酒精燈火焰旁倒平板。在用涂布分離法分離細菌時,為了使細菌均勻涂布在固體培養(yǎng)基上,常用玻璃刮刀把菌液涂布在培養(yǎng)基上。通過觀察菌落數(shù)推算細菌數(shù)目。培養(yǎng)基中可能有兩個或多個細菌緊挨在一起,共同形成一個菌落,因此觀察到的菌落數(shù)可能比實際菌落數(shù)低。為了防止實驗菌污染環(huán)境,實驗完成后需要對培養(yǎng)基進行滅菌處理,然后才能倒掉。(2)對微生物進行擴大培養(yǎng),通常使用LB液體培養(yǎng)基。一般用接種環(huán)轉移帶菌的培養(yǎng)物。接種時,先將接種環(huán)在酒精燈火焰上燒紅后冷卻,然后蘸取帶菌的培養(yǎng)物,放到新的培養(yǎng)基中。在液體培養(yǎng)基中,只要接種培養(yǎng)12 h,每毫升培養(yǎng)基中就有幾億個細菌。 答案:(1)固體 酒精

9、燈火焰 玻璃刮刀(涂布棒) 菌落 低 培養(yǎng)基中可能有兩個或多個細菌緊挨在一起,共同形成一個菌落 滅菌 (2)液體 接種環(huán) 12 7.據(jù)所學知識,回答下列問題: (1)菌落是由微生物在適宜_______培養(yǎng)基表面或內部生長繁殖到一定程度,形成肉眼可見、有一定形態(tài)結構的子細胞的群體。適宜的培養(yǎng)基,除了含微生物所需的營養(yǎng)物質以外,還要考慮_______、_______等。 (2)______________、______________這兩種分離方法都能使培養(yǎng)基的表面形成由__________形成的單個菌落,其中______________還可用于對菌液中的菌體進行計數(shù)。 解析:微生物在液體培養(yǎng)基中能較快繁殖,但不能形成子細胞的集群。當固體培養(yǎng)基表面接種的菌密度足夠低時,菌落就是從單個菌體分裂形成的。 答案:(1)固體 酸堿度 滲透壓 (2)劃線分離法 涂布分離法 單個菌體 涂布分離法 - 3 -

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