2019-2020學(xué)年高中生物 第4部分 淺嘗現(xiàn)代生物技術(shù) 第7課時 植物的組織培養(yǎng)學(xué)案 浙科版選修1

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1、第7課時　植物的組織培養(yǎng) [學(xué)習(xí)目標(biāo)]　1.進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)。2.嘗試植物激素的應(yīng)用。3.說明植物組織培養(yǎng)的原理。 一、植物的組織培養(yǎng) 1.概念：取一部分植物組織，如葉、芽、莖、根、花瓣或花粉等，在無菌的條件下接種在三角瓶中的瓊脂培養(yǎng)基上，給予一定的溫度和光照，使之產(chǎn)生愈傷組織，或進(jìn)而生根發(fā)芽。 2.原理：植物細(xì)胞的全能性。 3.過程：外植體愈傷組織芽、根―→植株。 4.實驗中使用的激素 (1)人工合成的萘乙酸代替生長素，人工合成的芐基腺嘌呤代替細(xì)胞分裂素。 特別提醒　植物中存在的天然激素都有相應(yīng)的使之分解的酶，這樣，天然激素在植物體內(nèi)的作用和存在時間就較短，而人工合成的

2、激素在植物中沒有相應(yīng)分解它的酶，所以作用和存在的時間長，作用效果明顯。 (2)兩者的摩爾濃度比決定組織是生根，還是生芽。細(xì)胞分裂素與生長素的比例高時，誘導(dǎo)芽的生成；兩者比例大致相等時，愈傷組織繼續(xù)生長而不分化；兩者比例低時，會趨于生根。 5.發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基的比較 (1)發(fā)芽培養(yǎng)基：細(xì)胞分裂素摩爾濃度大于生長素摩爾濃度的培養(yǎng)基。 (2)生根培養(yǎng)基：生長素摩爾濃度大于細(xì)胞分裂素摩爾濃度的培養(yǎng)基。 歸納總結(jié)　(1)細(xì)胞具有全能性的原因：生物體的每個體細(xì)胞都是由受精卵經(jīng)有絲分裂形成的，含有本物種全套的遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成完整個體所必需的全套基因。 (2)植物體細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的條件

3、：脫離原來所在植物體(離體培養(yǎng))、營養(yǎng)供給、激素控制、無菌條件、適宜的溫度、pH和光照等外界條件。 (3)細(xì)胞全能性大小的比較：受精卵>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞；幼嫩組織細(xì)胞>成熟組織細(xì)胞；分化程度低的細(xì)胞>分化程度高的細(xì)胞。 (4)植物組織培養(yǎng)的一般過程分析 名稱 過程 特點 條件 脫分化 由外植體形成愈傷組織 排列疏松、高度液泡化的薄壁細(xì)胞團(tuán) ①離體 ②提供營養(yǎng)物質(zhì)(有機物、無機物) ③提供激素 ④提供其他適宜條件 再分化 由愈傷組織形成幼苗或胚狀體結(jié)構(gòu) 有根、芽或有生根發(fā)芽的能力 營養(yǎng)生 長、生 殖生長 發(fā)育成完整的植物體 由根、莖、葉、花、果實、種子組

4、成 栽培 例1　(2019·紹興一中模擬)誘導(dǎo)叢狀苗時，培養(yǎng)基中應(yīng)添加的植物激素及配比是(　　) A.生長素濃度高于細(xì)胞分裂素濃度 B.生長素濃度低于細(xì)胞分裂素濃度 C.生長素濃度低于赤霉素濃度 D.生長素濃度高于赤霉素濃度 答案　B 解析　誘導(dǎo)叢狀苗時，培養(yǎng)基中應(yīng)添加的植物激素及配比是細(xì)胞分裂素濃度大于生長素濃度，B項符合題意。 方法技巧　植物激素在組織培養(yǎng)過程中的重要作用 (1)在配制好的MS培養(yǎng)基中，常常需要添加植物激素。植物激素中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。 (2)激素使用的先后順序及其用量的比例對細(xì)胞分裂和分化的影響 ①激

5、素使用的先后順序產(chǎn)生的影響 使用順序 實驗結(jié)果 先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素 有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化 先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素 細(xì)胞既分裂也分化 同時使用 分化頻率提高 ②激素用量比例產(chǎn)生的影響 生長素/細(xì)胞分裂素的值 結(jié)果 比值高時 趨于生根 比值低時 誘導(dǎo)芽的生成 比值適中 愈傷組織繼續(xù)生長不分化 例2　圖甲是植物組織培養(yǎng)過程示意圖，圖乙是植物激素對愈傷組織分化影響的示意圖。據(jù)圖回答下列問題： (1)植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有____________________________。 (2)為了保證植物的正常生長，

6、容器內(nèi)裝有的培養(yǎng)基中除含有小分子有機物和水，還需要含有植物生長所需要的______________。 (3)在過程A中，為了有利于嫩枝組織細(xì)胞啟動細(xì)胞分裂形成愈傷組織，常常需要在配制好的培養(yǎng)基中添加____________。嫩枝組織細(xì)胞接種后2～5d時，若發(fā)現(xiàn)其邊緣局部污染，原因可能是________________________________________________________________________。 (4)在圖甲過程B中，若愈傷組織沒有形成根，但分化出了芽，根據(jù)圖乙分析其原因可能是培養(yǎng)基中生長素________，細(xì)胞分裂素________；若要獲得更多的愈傷組

7、織，培養(yǎng)基中兩種激素的含量應(yīng)該是細(xì)胞分裂素量________，生長素少。 A.較少 B.較多 C.中等 D.不確定 答案　(1)全能性　(2)各種無機鹽　(3)植物激素　嫩枝組織細(xì)胞消毒不徹底　(4)A　B　C 解析　(1)植物細(xì)胞具有全能性，這是植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)。(2)為了保證植物的正常生長，培養(yǎng)基中一定要添加各種無機鹽。(3)植物組織培養(yǎng)過程中，啟動細(xì)胞分裂和愈傷組織的分化都離不開植物激素。培養(yǎng)的嫩枝組織細(xì)胞周圍發(fā)生局部污染，可能是因為嫩枝組織細(xì)胞消毒不徹底。(4)從圖乙可知，植物激素的種類及其濃度配比都會影響愈傷組織分化的方向，具體結(jié)合圖示和題干信息回答即可。

8、 二、菊花的組織培養(yǎng)過程 歸納總結(jié)　植物組織培養(yǎng)操作提醒 (1)若培養(yǎng)基中沒有添加人工合成的激素，得不到幼苗。 (2)菊花培養(yǎng)時莖段方向插反，莖基部朝上，頂端向下插入培養(yǎng)基內(nèi)，得不到叢狀苗。 (3)無菌操作不嚴(yán)格，如外植體帶菌，培養(yǎng)基和接種器具滅菌不徹底，接種時帶入雜菌等導(dǎo)致培養(yǎng)失敗。 例3　下面是有關(guān)“植物的組織培養(yǎng)”實驗的流程。請回答： (1)植物組織培養(yǎng)，就是在無菌條件下，將植物組織接種在________上，給予一定的溫度和光照，使之產(chǎn)生________組織，或進(jìn)而生根發(fā)芽。 (2)MS培養(yǎng)基由大量元素、微量元素和__________組成，圖示中，X培養(yǎng)基為

9、________培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中常用的凝固劑是________。對培養(yǎng)基徹底滅菌時，應(yīng)采用的滅菌方法是________________。 (3)待苗生根后，移至草炭土或蛭石中培養(yǎng)，這一階段通常稱為________。 A.接種 B.消毒 C.鍛煉 D.定植 答案　(1)培養(yǎng)基　愈傷　(2)有機成分　生根　瓊脂　高壓蒸汽滅菌法　(3)C 解析　(1)植物組織培養(yǎng)就是取一部分植物組織，在無菌條件下接種在培養(yǎng)基上，給予一定的溫度和光照，使之產(chǎn)生愈傷組織，或進(jìn)而生根發(fā)芽，培養(yǎng)為成熟植株的技術(shù)。(2)MS培養(yǎng)基由大量元素、微量元素和有機成分組成；分析圖示可知，X是發(fā)芽后的叢狀苗繼續(xù)培養(yǎng)獲得生根苗

10、的培養(yǎng)基，因此X是生根培養(yǎng)基；培養(yǎng)基中一般采用瓊脂作為凝固劑；培養(yǎng)基滅菌的方法常用的是高壓蒸汽滅菌法。(3)將生根的幼苗移入草炭土或蛭石中進(jìn)行培養(yǎng)的階段，稱之為鍛煉，C項符合題意。 特別提醒　LB培養(yǎng)基與MS培養(yǎng)基的比較 LB培養(yǎng)基以蛋白胨、酵母提取物等有機營養(yǎng)為主，MS培養(yǎng)基則需提供大量的無機營養(yǎng)，無機鹽混合物包括植物生長必需的大量元素和微量元素兩大類。此外進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需添加特定配比的生長素和細(xì)胞分裂素。 例4　鐵皮石斛是我國名貴中藥，生物堿是其有效成分之一，用組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖其幼苗的流程如下： 新生營養(yǎng)芽―→叢狀苗幼苗 請回答以下問題： (1)選用新生營養(yǎng)芽為培養(yǎng)

11、材料的原因是_______________________，原球莖細(xì)胞的細(xì)胞壁______(填“厚”或“薄”)。 (2)某小組為研究培養(yǎng)鐵皮石斛的培養(yǎng)基中蔗糖和光各自的作用，進(jìn)行了對照實驗，結(jié)果如下： 培養(yǎng)條件 加蔗糖 不加蔗糖 光 正常生長，分化 不生長，死亡 暗 只生長，不分化 不生長，死亡 根據(jù)以上實驗結(jié)果，下列說法正確的是________。 A.光為生長提供能量，蔗糖促進(jìn)細(xì)胞分化 B.整個組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基中都不用加入蔗糖也可發(fā)育成幼苗 C.光照只會影響到光合作用的效率 D.蔗糖為生長、分化提供能量，光促進(jìn)細(xì)胞分化 (3)生物堿屬于鐵皮石斛的__

12、______代謝產(chǎn)物，除了從植株中提取，也可以通過將含有原球莖的試管放在搖床上，通過________懸浮培養(yǎng)分散成單細(xì)胞，然后培養(yǎng)特定細(xì)胞系實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。 答案　(1)分裂旺盛，全能性容易表達(dá)　薄　(2)D　(3)次生　液體 解析　(1)新生的芽幼嫩，分裂能力強，全能性易表達(dá)，植物組織培養(yǎng)過程中一般選用新生營養(yǎng)芽為培養(yǎng)材料。原球莖細(xì)胞類似愈傷組織，由于愈傷組織是一團(tuán)未分化的薄壁細(xì)胞，因此，原球莖細(xì)胞的細(xì)胞壁薄。(2)通過對比加蔗糖條件下，有光組能夠正常分化，無光組無法發(fā)生分化，說明光能促進(jìn)細(xì)胞分化；比較不加蔗糖條件下，有無光照均死亡，說明蔗糖為生長提供能量。若保證組織培養(yǎng)正常，需要加入蔗

13、糖，故A、B、C錯誤，D正確。(3)生物堿屬于鐵皮石斛的次生代謝產(chǎn)物，獲取方法可以從植株中提取，也可以通過液體懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，將愈傷組織(原球莖)分散成單細(xì)胞，然后通過培養(yǎng)特定細(xì)胞系實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。 1.判斷正誤： (1)在植物組織培養(yǎng)中，為了誘導(dǎo)菊花試管苗生根，在培養(yǎng)基中一般不加入NAA(　　) (2)LB培養(yǎng)基和MS培養(yǎng)基相同，都能用于微生物培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)(　　) (3)MS培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑可鑒定分解尿素的微生物(　　) (4)在植物組織培養(yǎng)中，二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后可得到穩(wěn)定遺傳的植株(　　) (5)制備MS培養(yǎng)基和制備母液時，不同營養(yǎng)成分配制比例

14、有所不同(　　) (6)在植物組織培養(yǎng)中，以花粉作為外植體可得到單倍體植株(　　) (7)植物組織培養(yǎng)過程中無需從外部添加糖類(　　) (8)每次配制MS培養(yǎng)基都需精確稱量配方中的各種成分(　　) (9)感染雜菌的培養(yǎng)基和使用過的培養(yǎng)基都必須經(jīng)滅菌處理后才能丟棄(　　) 答案　(1)×　(2)×　(3)×　(4)×　(5)√　(6)√　(7)×　(8)×　(9)√ 2.某愈傷組織在如圖甲所示的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間后得到如圖乙所示的結(jié)構(gòu)。經(jīng)分析可知該培養(yǎng)基中(　　) A.細(xì)胞分裂素多，生長素少 B.細(xì)胞分裂素少，生長素多 C.細(xì)胞分裂素和生長素的用量相等 D.只有生長素

15、 答案　B 解析　從圖乙中可以看出，該培養(yǎng)基有利于生根且抑制芽的形成，所以可推斷該培養(yǎng)基中生長素多，細(xì)胞分裂素少。 3.在菊花莖段的組織培養(yǎng)實驗中，對已長出的健壯叢狀苗應(yīng)該進(jìn)行怎樣的處理(　　) A.移入日光下，在生芽培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng) B.移入日光下，在生根培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng) C.轉(zhuǎn)入黑暗遮陰環(huán)境中，在草炭土或蛭石中栽種 D.轉(zhuǎn)入黑暗遮陰環(huán)境中，在80%以上濕度下，在任意自然泥土中栽種 答案　B 解析　植物的組織培養(yǎng)過程按照以下流程進(jìn)行：植物組織→叢狀苗→生根苗→幼苗→成體，從上述流程不難發(fā)現(xiàn)，只有選項B是正確的。 4.植物組織培養(yǎng)和微生物培養(yǎng)都需要無菌操作，下列不適宜用高壓蒸

16、汽滅菌的是(　　) A.接種環(huán)和鑷子 B.三角瓶和廣口瓶 C.發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基 D.用于培養(yǎng)的幼莖和幼芽 答案　D 解析　微生物培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中所需的操作器具、培養(yǎng)基均需要高壓蒸汽滅菌，而微生物的菌種和植物組織培養(yǎng)的幼莖和幼芽不能用高壓蒸汽滅菌，否則會造成其死亡，D項符合題意。 5.請分析回答下列有關(guān)生物技術(shù)專題方面的問題： (1)下表是一種培養(yǎng)基配方，請回答下列問題： 成分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 瓊脂 含量 1.4g 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g ①該培養(yǎng)基高壓

17、蒸汽滅菌時要在______________g/cm2壓力下滅菌30分鐘，為了防止尿素加熱分解，需要單獨用________________過濾去除細(xì)菌。 ②該培養(yǎng)基屬于什么培養(yǎng)基(多選)________。 A.液體　B.固體　C.鑒定　D.選擇　F.天然 ③如果要對培養(yǎng)的菌落進(jìn)行純化，一般采用__________(方法)，操作的第一步及每次劃線之前都要對接種環(huán)進(jìn)行________處理，目的是對接種環(huán)進(jìn)行________。 ④制備培養(yǎng)基的操作步驟是________(填選項字母)。 a.倒平板　b.計算　c.溶化　d.稱量　e.滅菌 A.a→b→c→d→e B.e→b→d→c→a C.

18、b→d→c→a→e D.b→d→c→e→a (2)如圖是植物組織培養(yǎng)的示意簡圖，請回答下列問題： ①B表示的是________________，它是由高度液泡化的、呈無定型狀態(tài)的薄壁細(xì)胞組成的。 ②A能被培養(yǎng)成為C的根本原因是______________________________________________ ________________________________________________________________________。 ③植物激素中______________________是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。 答案　(1)①

19、500　G6玻璃砂漏斗?、贐D　③劃線分離法　灼燒　滅菌?、蹹　(2)①愈傷組織　②A具有發(fā)育成該種植物所需的全部基因?、奂?xì)胞分裂素和生長素 解析　(1)①題干培養(yǎng)基配方中有葡萄糖，所以在高壓蒸汽滅菌時要在500g/cm2壓力下滅菌30分鐘，為了防止尿素加熱分解，需要單獨用G6玻璃砂漏斗過濾去除細(xì)菌。②該培養(yǎng)基中添加了瓊脂，尿素作為唯一氮源物質(zhì)，故該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基，用于選擇含有脲酶的細(xì)菌。③如果要對培養(yǎng)的菌落進(jìn)行純化，一般采用劃線分離法，操作的第一步及每次劃線之前都要對接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌。④制備培養(yǎng)基的操作步驟是：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。(2)①外植體經(jīng)脫分化產(chǎn)生愈

20、傷組織，愈傷組織是由高度液泡化的、呈無定型狀態(tài)的薄壁細(xì)胞組成的。②外植體A能被培養(yǎng)成為植株C的根本原因是A具有發(fā)育成該種植物所需的全部基因。③植物激素中細(xì)胞分裂素和生長素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。 題組一　植物組織培養(yǎng)的原理和基本過程 1.影響植物組織培養(yǎng)的因素包括(　　) ①培養(yǎng)基的配制?、谕庵搀w的選取?、奂に氐倪\用④消毒?、轀囟?、pH、光照 A.①②③④⑤ B.①②③ C.①②③④ D.①②③⑤ 答案　A 解析　進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，對培養(yǎng)條件要求相當(dāng)嚴(yán)格，需要配制適宜培養(yǎng)基；外植體的脫分化因植物種類、器官來源及其生理狀態(tài)的不同而有很大差別；另外在培養(yǎng)過

21、程中需要無菌操作及適宜的溫度、pH、光照等條件。 2.下列關(guān)于運用植物組織培養(yǎng)技術(shù)產(chǎn)生新個體的敘述，錯誤的是(　　) A.屬于無性生殖 B.主要理論依據(jù)是植物細(xì)胞具有全能性 C.培養(yǎng)過程中由于人工培養(yǎng)基含大量營養(yǎng)，不需光照就能發(fā)育成完整植株 D.人工培養(yǎng)基中含植物生長發(fā)育所需的全部營養(yǎng)物質(zhì)，包括礦質(zhì)元素、糖、維生素等 答案　C 解析　植物組織培養(yǎng)技術(shù)即植物無菌培養(yǎng)技術(shù)，是根據(jù)植物細(xì)胞具有全能性的原理將外植體培養(yǎng)成完整植株的技術(shù)，盡管培養(yǎng)基中含大量營養(yǎng)，培養(yǎng)過程中仍需光照條件，方可形成完整植株(葉綠素的形成需要光照)。 3.(2018·樂清中學(xué)期末)下圖表示植物組織培養(yǎng)過程。

22、據(jù)圖分析，下列敘述正確的是(　　) A.②試管的培養(yǎng)基中含有植物生長調(diào)節(jié)劑，不含有有機物 B.③試管中的細(xì)胞能進(jìn)行減數(shù)分裂 C.調(diào)節(jié)④培養(yǎng)基中植物生長調(diào)節(jié)劑的比例可誘導(dǎo)產(chǎn)生不同的植物器官 D.⑤植株根尖細(xì)胞的全能性比①植株根尖細(xì)胞的強 答案　C 解析?、谠嚬艿呐囵B(yǎng)基中含有植物生長調(diào)節(jié)劑和有機物等，A錯誤；③試管中的細(xì)胞進(jìn)行分裂的方式是有絲分裂，B錯誤；調(diào)節(jié)④培養(yǎng)基中植物生長調(diào)節(jié)劑的比例，可誘導(dǎo)產(chǎn)生根和芽，C正確；⑤植株根尖細(xì)胞的全能性與①植株根尖細(xì)胞的全能性相同，D錯誤。 4.(2019·桐鄉(xiāng)質(zhì)檢)無菌技術(shù)是植物組織培養(yǎng)能否獲得成功的關(guān)鍵，以下說法正確的是(　　) ①由于植

23、物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差，對無菌操作的要求非常嚴(yán)格?、趯ε囵B(yǎng)基及器械用高壓蒸汽滅菌?、蹖ε囵B(yǎng)材料進(jìn)行表面消毒時，一方面要考慮藥劑的消毒效果，另一方面還要考慮植物材料的耐受能力　④培養(yǎng)中不同藥劑、不同植物材料，甚至不同器官要區(qū)別對待　⑤對培養(yǎng)材料可用高壓蒸汽滅菌?、奕绻恍⌒囊鹞廴荆瑢⒖赡茉斐膳囵B(yǎng)工作前功盡棄 A.①②③④⑤ B.①②③④ C.①②③④⑥ D.①②③④⑤⑥ 答案　C 解析　對培養(yǎng)材料用高壓蒸汽滅菌會殺死細(xì)胞。 題組二　植物激素的應(yīng)用 5.在植物組織培養(yǎng)過程中，生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值高時，下列描述正確的是(　　) A.有利于根的分化和芽的形

24、成 B.不利于根的分化和芽的形成 C.有利于芽的形成，抑制根的分化 D.有利于根的分化，抑制芽的形成 答案　D 解析　生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值高時，有利于根的分化，抑制芽的形成；比值低時，有利于芽的分化，抑制根的形成；比值適中時，促進(jìn)愈傷組織的形成。 6.下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)中植物激素使用的說法中，不正確的是(　　) A.植物組織培養(yǎng)中的關(guān)鍵性激素是生長素和細(xì)胞分裂素 B.先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素，有利于細(xì)胞分裂和分化 C.先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素，細(xì)胞既分裂又分化 D.同時使用生長素和細(xì)胞分裂素時，兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向 答案　B 解

25、析　用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中除營養(yǎng)成分外，還需添加植物激素，一般包括生長素和細(xì)胞分裂素；外植體脫分化、再分化的誘導(dǎo)方向取決于二者的比例；先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素，有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素，對細(xì)胞的分裂和分化均有利。 題組三　菊花組織培養(yǎng)的實驗操作 7.進(jìn)行植物組織培養(yǎng)的基本流程是(　　) A.配制培養(yǎng)基→取外植體消毒→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培 B.配制培養(yǎng)基→取外植體消毒→接種→栽培→移栽→培養(yǎng) C.配制培養(yǎng)基→取外植體消毒→接種→移栽→培養(yǎng)→栽培 D.取外植體消毒→配制培養(yǎng)基→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培 答案　A 解析　進(jìn)行植物組織培養(yǎng)的

26、一般流程是：配制培養(yǎng)基并滅菌，再取植物幼嫩的部分(外植體)并消毒，然后接種到培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，形成愈傷組織后移栽長出試管苗，最后栽種在土壤中。 8.(2019·義烏模擬)菊花的組織培養(yǎng)需要嚴(yán)格的無菌操作，下列說法不正確的是(　　) A.對培養(yǎng)基連同其他器械一起進(jìn)行高壓蒸汽滅菌 B.幼苗要先移植到消過毒的蛭石或者草炭土等環(huán)境下生活一段時間 C.用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的生長，一旦感染雜菌則前功盡棄 D.將菊花莖段插入時應(yīng)注意方向，不應(yīng)倒插，是為了防止雜菌污染 答案　D 解析　植物的組織培養(yǎng)需要嚴(yán)格的無菌操作，將菊花莖段插入時要注意莖段的形態(tài)學(xué)上下端，不應(yīng)倒插，是

27、為了生長素的極性運輸，保證成活率，D項錯誤。 9.菊花莖的切段在發(fā)芽培養(yǎng)基培養(yǎng)的過程中，有關(guān)描述錯誤的是(　　) A.莖的切段不能帶有葉片 B.要始終保持在無菌環(huán)境中培養(yǎng) C.培養(yǎng)基中芐基腺嘌呤與萘乙酸的比例要較高 D.莖的切段經(jīng)過脫分化和再分化可形成叢狀苗 答案　A 解析　菊花切段接種時，將每段放入1瓶生芽培養(yǎng)基中，每段至少有1張葉片，A錯誤；植物組織培養(yǎng)在生芽和生根的過程中，要始終保持無菌環(huán)境，B正確；發(fā)芽培養(yǎng)基中，細(xì)胞分裂素類激素的含量高于生長素類激素的含量，在菊花組織培養(yǎng)過程中，細(xì)胞分裂素類激素采用的是芐基腺嘌呤，生長素類激素采用的是萘乙酸，C正確；莖的切段(外植體)通過

28、脫分化形成愈傷組織，再通過再分化產(chǎn)生胚狀體或叢狀苗，D正確。 10.在菊花的組織培養(yǎng)操作完成了3～4天后，觀察同一溫室中的外植體，發(fā)現(xiàn)有的瓶內(nèi)外植體正常生長，有的瓶內(nèi)外植體死亡，你認(rèn)為外植體死亡的原因不可能是(　　) A.接種時培養(yǎng)基滅菌不徹底 B.接種工具灼燒后未待冷卻就接種外植體 C.愈傷組織形成初期沒有給予充足的光照 D.培養(yǎng)過程中保持溫度、pH的適宜，但沒有及時調(diào)整各種營養(yǎng)物質(zhì)、激素的比例 答案　C 解析　接種時培養(yǎng)基滅菌不徹底，外植體就會受到微生物的污染，從而導(dǎo)致實驗前功盡棄，A項不符合題意；接種工具灼燒后未待冷卻就接種外植體，會導(dǎo)致溫度過高而殺死外植體，B項不符合

29、題意；愈傷組織形成過程中，細(xì)胞還沒有開始再分化，沒有葉綠素和葉綠體的形成，不可能進(jìn)行光合作用，因此愈傷組織形成初期不需要充足的光照，C項符合題意；培養(yǎng)的不同階段，對主要營養(yǎng)物質(zhì)和激素的需求不同，所以培養(yǎng)過程中要及時調(diào)整各種營養(yǎng)物質(zhì)、激素的比例，D項不符合題意。 11.(2018·浙江名校協(xié)作體聯(lián)考)下圖表示菊花的嫩枝離體培養(yǎng)過程，請據(jù)圖回答下面的問題： (1)若使用自然生長的嫩枝進(jìn)行組織培養(yǎng)，需將材料放在70%乙醇中浸泡10min，再放入____________中浸泡5min，然后用另一該溶液浸泡5min，最后在________中用無菌水清洗。 (2)實驗中使用的生長素是人工合成的_

30、_____________，培養(yǎng)基中的生長素和細(xì)胞分裂素用量的比值________(填“高”或“低”)時，有利于芽的分化。 (3)待生根后，將苗移至草炭土或蛭石中，用玻璃罩或塑料布保持________(A.8%　B.30%　C.60%　D.80%)以上的濕度，2～3天后打開玻璃罩逐漸降低濕度進(jìn)行鍛煉，直到將罩全部打開處于自然濕度下為止。 答案　(1)5%次氯酸鈉溶液　超凈臺　(2)萘乙酸(NAA)　低　(3)D 解析　(1)對自然莖段進(jìn)行消毒時，具體操作為：70%乙醇消毒10min→5%次氯酸鈉溶液浸泡5min→另一5%次氯酸鈉溶液浸泡5min→在超凈臺中用無菌水清洗。(2)菊花的嫩枝離

31、體培養(yǎng)過程中，使用的生長素是人工合成的萘乙酸(NAA)，生長素和細(xì)胞分裂素的比值能夠影響菊花莖段的分化，當(dāng)培養(yǎng)基中的生長素和細(xì)胞分裂素用量的比值低時，有利于芽的分化，反之有利于根的分化。(3)待生根后，將苗移至草炭土或蛭石中進(jìn)行濕度鍛煉，先用玻璃罩或塑料布保持80%以上的濕度，2～3天后打開玻璃罩逐漸降低濕度進(jìn)行鍛煉，直到將罩全部打開處于自然濕度下為止，D項符合題意。 12.(2019·東陽適應(yīng)測試)植物組織培養(yǎng)是一種無性繁殖技術(shù)，以下是實驗室進(jìn)行植物組織培養(yǎng)的一般過程。 →→→→ 請回答： (1)以下設(shè)備及用品中，該實驗無需使用的是________。 A.酒精燈 B.滅菌鍋 C.

32、封口膜 D.玻璃刮刀 (2)培養(yǎng)過程中涉及的培養(yǎng)基有：MS培養(yǎng)基、________、生根培養(yǎng)基。與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)一般要添加____________、____________作為生長調(diào)節(jié)劑。 (3)下表所列該實驗設(shè)備、用品及材料與其滅菌或消毒方法的對應(yīng)關(guān)系中，錯誤的選項是________。 選項 對象 方法 A 三角瓶 高壓蒸汽滅菌 B 培養(yǎng)基 G6玻璃砂漏斗過濾 C 超凈臺 紫外燈照射 D 自然生長的莖段 70%乙醇和5%次氯酸鈉先后浸泡 (4)離體組織接種后脫分化形成______________，在不同配比激素的誘導(dǎo)下，依次經(jīng)歷

33、________和生根苗兩個階段，形成試管苗。定植前還需要將試管苗移栽至草炭土或蛭石中繼續(xù)培養(yǎng)，其目的是_____________________________________________________________。 答案　(1)D　(2)發(fā)芽培養(yǎng)基　生長素(或生長素類似物或萘乙酸)　細(xì)胞分裂素(或細(xì)胞分裂素類似物或芐基腺嘌呤)　(3)B　(4)愈傷組織　叢狀苗　濕度鍛煉或煉苗(以適應(yīng)土壤種植) 解析　(1)在植物組織培養(yǎng)過程中，需要用到酒精燈、滅菌鍋、封口膜等，玻璃刮刀是在做微生物分離實驗時使用的。(2)在植物組織培養(yǎng)過程中，涉及的培養(yǎng)基有：MS培養(yǎng)基、發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基

34、。與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)一般要添加生長素和細(xì)胞分裂素或其類似物作為生長調(diào)節(jié)劑。(3)三角瓶和培養(yǎng)基都需要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A正確、B錯誤；超凈臺需要用紫外燈照射，C正確；對自然生長的莖段，需要先后用70%乙醇和5%次氯酸鈉進(jìn)行浸泡，最后用無菌水清洗，D正確。(4)外植體經(jīng)脫分化形成愈傷組織，在不同配比激素的誘導(dǎo)下，依次經(jīng)歷叢狀苗和生根苗兩個階段，形成試管苗。定植前還需要將試管苗移栽至草炭土或蛭石中進(jìn)行濕度鍛煉。 13.(2019·長興高二檢測)請回答下列有關(guān)生物技術(shù)實踐方面的問題： (1)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用十分廣泛，果酒和果醋就是常見例子。當(dāng)發(fā)酵裝置由果酒釀造轉(zhuǎn)為果醋釀造時，首先要

35、提高_(dá)___________，其次要注意通入____________。 (2)微生物培養(yǎng)基通常在壓力為100kPa，溫度為________℃條件下，滅菌15～30min，然后待培養(yǎng)基冷卻至________℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板。 (3)菊花的組織培養(yǎng)，一般選擇________________的莖上部新萌生的側(cè)枝；進(jìn)行菊花組織培養(yǎng)時，一般將pH控制在5.8左右，溫度控制在________℃，并每天光照不少于14.5h。 答案　(1)發(fā)酵溫度　無菌空氣　(2)121　60　(3)未開花植株　18～25 解析　(1)果酒制作需要在缺氧且溫度為25～30℃的環(huán)境中進(jìn)行，而果醋制作要在有氧且溫度為30～35℃的環(huán)境中進(jìn)行，所以當(dāng)發(fā)酵裝置由果酒釀造轉(zhuǎn)為果醋釀造時，首先要提高發(fā)酵溫度，并注意適時通過充氣口通入無菌空氣。 (2)微生物培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌，即在壓力為100kPa，溫度為121℃條件下，滅菌15～30min，然后待培養(yǎng)基冷卻至60℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板。 (3)菊花的組織培養(yǎng)，一般選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝；一般將pH控制在5.8左右，溫度控制在18～25℃，并保證每天光照不少于14.5h。 14