高考生物二輪復(fù)習(xí) 專題能力訓(xùn)練16 基因工程、細(xì)胞工程（含解析）-人教版高三生物試題

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1、專題能力訓(xùn)練十六　基因工程、細(xì)胞工程 1.(2019全國Ⅰ理綜)基因工程中可以通過PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。回答下列問題。 (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀ā　　　　　　　『汀　　　　?。? (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是　　　　　。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是　?　　　　　　　　　　　　。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的　　　　　。? (3)目前在PCR反應(yīng)中使用Taq酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因是　　　　　　　　。 答案:(1)基

2、因組文庫　cDNA文庫 (2)解旋酶　加熱至90~95 ℃　氫鍵 (3)Taq酶熱穩(wěn)定性高,而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活 解析:(1)基因文庫包括基因組文庫和cDNA文庫。(2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,由解旋酶解開DNA雙鏈。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是加熱至90~95℃。這兩個解鏈過程都破壞了DNA雙鏈分子中的氫鍵。(3)溫度會影響酶的活性。PCR過程是在高溫條件下進(jìn)行的。Taq酶耐高溫,而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會變性失活。 2.(2018全國Ⅱ理綜)某種熒光蛋白(GFP)在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會發(fā)出綠色熒光,這一

3、特性可用于檢測細(xì)胞中目的基因的表達(dá),某科研團(tuán)隊將某種病毒的外殼蛋白(L1)基因連接在GFP基因的5'末端,獲得了L1-GFP融合基因(簡稱為甲),并將其插入質(zhì)粒P0,構(gòu)建了真核表達(dá)載體P1,其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點的示意圖如下,圖中E1~E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同。 回答下列問題。 (1)據(jù)圖推斷,該團(tuán)隊在將甲插入質(zhì)粒P0時,使用了兩種限制酶,這兩種酶是　　　　　　　,使用這兩種酶進(jìn)行酶切是為了保證　　　　　　,也是為了保證　　　　　　　　　　　　　　　　。? (2)將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細(xì)胞后,若在該細(xì)胞中觀察到了綠色熒光,則說明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了　　　　和　

4、　　　過程。? (3)為了獲得含有甲的牛,該團(tuán)隊需要做的工作包括:將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的　　　　　移入牛的　　　　　　　　中,體外培養(yǎng)、胚胎移植等。? (4)為了檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中,某同學(xué)用PCR方法進(jìn)行鑒定,在鑒定時應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的　　　　　　　　(填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”)作為PCR模板。? 答案:(1)E1和E4　甲的完整　甲與載體正確連接 (2)轉(zhuǎn)錄　翻譯 (3)細(xì)胞核　去核卵母細(xì)胞 (4)核DNA 3.下表是幾種限制酶識別序列及其切割位點,圖1、圖2中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點,其中切割位點相同的酶不重復(fù)標(biāo)注。請回答下列

5、問題。 限制酶 BamHⅠ BclⅠ Sau3AⅠ HindⅢ 識別序列及切割位點 (1)用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒,應(yīng)選用　　　　　　　　兩種限制酶切割,酶切后的載體和目的基因片段,通過　　　　酶作用后獲得重組質(zhì)粒。為了擴(kuò)增重組質(zhì)粒,需將其轉(zhuǎn)入處于　　　　　態(tài)的大腸桿菌。? (2)為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌,應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加　　　　　　,平板上長出的菌落,常用PCR鑒定,所用的引物組成為圖2中　　　　　　　　　　　　　　。? (3)若BamHⅠ酶切的DNA末端與BclⅠ酶切的DNA末端連接,連接部位的6個堿基對序列為　　　　　　

6、　　　　　,對于該部位,這兩種酶　　　　　　　(填“都能”“都不能”或“只有一種能”)切開。? (4)若用Sau3AⅠ切圖1質(zhì)粒最多可能獲得　　　　種大小不同的DNA片段。? 答案:(1)BclⅠ和HindⅢ　連接　感受　(2)四環(huán)素　引物甲和引物丙　(3)TGATCCACTAGGGGATCACCTAGT　都不能　(4)7 4.(2019全國Ⅱ理綜)植物組織培養(yǎng)技術(shù)在科學(xué)研究和生產(chǎn)實踐中得到了廣泛的應(yīng)用?；卮鹣铝袉栴}。 (1)植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比,這種微型繁殖技術(shù)的特點是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(答出2點即可)。? (2

7、)通過組織培養(yǎng)技術(shù),可把植物組織細(xì)胞培養(yǎng)成胚狀體,再通過人工種皮(人工薄膜)包裝得到人工種子(如圖所示),這種人工種子在適宜條件下可萌發(fā)生長。人工種皮具備透氣性的作用是　　　　　　。人工胚乳能夠為胚狀體生長提供所需的物質(zhì),因此應(yīng)含有植物激素、　　　　和　　　　　等幾類物質(zhì)。? (3)用脫毒苗進(jìn)行繁殖,可以減少作物感染病毒。為了獲得脫毒苗,可以選取植物的　　　　　進(jìn)行組織培養(yǎng)。? (4)植物組織培養(yǎng)技術(shù)可與基因工程技術(shù)相結(jié)合獲得轉(zhuǎn)基因植株。將含有目的基因的細(xì)胞培養(yǎng)成一個完整植株的基本程序是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(用流程圖表示)。? 答案:(1)能保持植物原有的遺傳特性,

8、繁殖速度快　(2)有利于胚狀體進(jìn)行呼吸作用　礦質(zhì)元素　糖　(3)莖尖　(4)含目的基因的細(xì)胞愈傷組織小植株 解析:(1)基于植物組織培養(yǎng)技術(shù)的微型繁殖實現(xiàn)了植物克隆,屬于無性繁殖技術(shù)。與常規(guī)的種子繁殖方法(有性生殖)相比,微型繁殖技術(shù)可以保持植物原有的遺傳特性,快速實現(xiàn)種苗的大量繁殖。(2)人工種子的人工種皮要保證胚狀體正常的生命活動,一方面要有透氣性,使胚狀體能夠進(jìn)行呼吸作用;另一方面要有子葉或胚乳的功能,為胚狀體生長發(fā)育提供必需的植物激素、礦質(zhì)元素和糖等幾類物質(zhì)。(3)植物分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒很少,甚至無病毒。用莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng),再生的植株就有可能不帶病毒,從而獲得脫毒苗。(4)將

9、含有目的基因的細(xì)胞培養(yǎng)成一個完整植株,應(yīng)首先對含有目的基因的細(xì)胞進(jìn)行脫分化處理獲得愈傷組織,然后誘導(dǎo)其再分化,即可獲得試管苗(小植株)。 5.菊天牛是菊花的主要害蟲之一?？蒲腥藛T將抗蟲基因轉(zhuǎn)入菊花,培育出抗蟲菊花。下圖是獲得轉(zhuǎn)基因菊花的技術(shù)流程,請據(jù)圖回答下列問題。 注卡那霉素抗性基因(kanR)作為標(biāo)記基因,菊花葉片對卡那霉素高度敏感。 (1)為了促進(jìn)土壤農(nóng)桿菌吸收重組質(zhì)粒,可用　　　　　　處理土壤農(nóng)桿菌,使其處于　　　　　　　以便吸收重組質(zhì)粒。? (2)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌的目的是利用農(nóng)桿菌能夠　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　的特點,使目的基因進(jìn)入受體

10、細(xì)胞中,并插入菊花細(xì)胞的　　　　　　　上,最終形成轉(zhuǎn)基因植株。? (3)將愈傷組織轉(zhuǎn)移到添加一定濃度植物激素和　　　　　　　　　的培養(yǎng)基中,在適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng),篩選轉(zhuǎn)基因菊花。? (4)用PCR方法檢測轉(zhuǎn)基因菊花是否含有目的基因時,需根據(jù)　　　　　　　　　　　的核苷酸序列設(shè)計特異引物,以　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　為模板進(jìn)行第一輪擴(kuò)增。? (5)將轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料以適當(dāng)比例混合后飼喂菊天牛2齡幼蟲,實驗結(jié)果如下表所示。 組　　別 死亡率/% 實驗組 轉(zhuǎn)基因植株1 60.00 轉(zhuǎn)基因植株2 53.33 對照組 13.33 ①對照組應(yīng)飼喂等

11、量的　　　　　　　　　　　　　　　　。? ②據(jù)表分析,　　　　　　　　　　　　　　　　差異顯著,說明轉(zhuǎn)基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強(qiáng)的毒殺作用。? 答案:(1)Ca2+(或CaCl2)　感受態(tài)　(2)感染菊花(或植物)細(xì)胞,并將T-DNA轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞　染色體　(3)卡那霉素　(4)抗蟲基因(目的基因)　轉(zhuǎn)基因菊花的DNA(或“含目的基因的菊花的DNA”)　(5)①非轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料的混合物?、趯嶒灲M與對照組死亡率 6.科學(xué)家利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)成功獲得了番茄—馬鈴薯雜種植株,為了便于雜種細(xì)胞的篩選和鑒定,科學(xué)家利用紅色熒光和綠色熒光分別標(biāo)記番茄和馬鈴薯的原生質(zhì)體膜上的蛋

12、白質(zhì),其培育過程如下圖所示。 (1)植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的生物學(xué)原理有　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。? (2)過程①常用的酶是　　　　　　　　　　　　,細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是　　　　　　　　　　　。? (3)植物原生質(zhì)體融合常利用　　　　　　(化學(xué)試劑)誘導(dǎo),在鑒定雜種原生質(zhì)體時可用顯微鏡觀察,根據(jù)細(xì)胞膜表面的熒光的不同可觀察到　　　種不同的兩兩融合類型的原生質(zhì)體,當(dāng)觀察到　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　時,可判斷該原生質(zhì)體是由番茄和馬鈴薯融合而成的。? (4)過程③和過程④依次為　　　　　　　　　　　,過程④中的培養(yǎng)基常添加的植物激素是　　　　　　　

13、　　　　　　　　　　。? (5)若番茄體細(xì)胞內(nèi)有m條染色體,馬鈴薯體細(xì)胞內(nèi)有n條染色體,則“番茄—馬鈴薯”細(xì)胞在有絲分裂后期含　　　　　條染色體。若雜種細(xì)胞培育成的“番茄—馬鈴薯”植株為四倍體,則此雜種植株的花粉經(jīng)離體培育得到的植株屬于　　　　　　植株。? 答案:(1)細(xì)胞膜的流動性、植物細(xì)胞的全能性　(2)纖維素酶和果膠酶　形成了新的細(xì)胞壁　(3)聚乙二醇(PEG)　3　融合的細(xì)胞表面既有紅色熒光又有綠色熒光　(4)脫分化和再分化　生長素和細(xì)胞分裂素　(5)2(m+n)　單倍體 解析:(1)植物體細(xì)胞雜交要將不同種的植物細(xì)胞誘導(dǎo)融合成一個雜種細(xì)胞,再利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將雜種細(xì)胞培育成

14、植株,體現(xiàn)的生物學(xué)原理為細(xì)胞膜的流動性和植物細(xì)胞的全能性。(2)植物細(xì)胞融合時需先用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體,雜種細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁是細(xì)胞融合完成的標(biāo)志。(3)植物原生質(zhì)體融合過程常利用化學(xué)試劑聚乙二醇(PEG),融合后有3種不同的兩兩融合類型的原生質(zhì)體,分別是番茄細(xì)胞自身融合細(xì)胞(紅色熒光)、馬鈴薯細(xì)胞自身融合細(xì)胞(綠色熒光)、番茄—馬鈴薯融合細(xì)胞(紅色+綠色熒光)三類。(4)雜種細(xì)胞形成愈傷組織的過程屬于植物組織培養(yǎng)過程中的脫分化,愈傷組織形成植物體的過程屬于再分化。(5)雜種細(xì)胞的染色體數(shù)為融合前兩種細(xì)胞染色體數(shù)之和,即(m+n)。細(xì)胞有絲分裂后期,由于著絲點分

15、裂,姐妹染色單體分開,使得雜種細(xì)胞中的染色體數(shù)目加倍為2(m+n),經(jīng)過花粉離體培養(yǎng)形成的植株不論細(xì)胞中含有幾個染色體組均屬于單倍體。 7.(2017全國Ⅱ理綜)Ⅰ.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}。 (1)在進(jìn)行基因工程操作時,若要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA,常選用嫩葉而不選用老葉作為實驗材料,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　。提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是　　　　　　　　　。? (2)以mRNA為材料可以獲得cDNA,其原理是　　　　　　　　　　

16、　　　　　　　　　　。? (3)若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá),需要通過質(zhì)粒載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(答出兩點即可)。? (4)當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是　　　　　　　　　。? (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　。? Ⅱ.Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞?？蒲腥藛T利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如下圖所示。

17、 (1)步驟①中,在核移植前應(yīng)去除卵母細(xì)胞的　　　　　　　(結(jié)構(gòu))。? (2)培養(yǎng)細(xì)胞過程中,要置于CO2培養(yǎng)箱中,其中CO2的主要作用是　　　　　　　　　　。? (3)步驟③中,需要構(gòu)建含有Rag2基因的表達(dá)載體?？梢愿鶕?jù)Rag2基因的　　　　　　　　　　　　設(shè)計引物,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增Rag2基因片段。用HindⅢ 和PstⅠ限制酶分別在片段兩側(cè)進(jìn)行酶切獲得Rag2基因片段。為將該片段直接連接到表達(dá)載體,所選擇的表達(dá)載體上應(yīng)具有　　　　　　　　　　　　　酶的酶切位點。? (4)為檢測Rag2基因的表達(dá)情況,可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的　　　　　　　,用抗Rag2蛋白的抗體進(jìn)行雜交實驗。? 答案:Ⅰ.(1)嫩葉組織細(xì)胞易破碎　防止RNA降解　(2)在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以mRNA為模板按照堿基互補(bǔ)配對的原則可以合成cDNA　(3)目的基因無復(fù)制原點;目的基因無表達(dá)所需啟動子 (4)磷酸二酯鍵　(5)目的基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯異常 Ⅱ.(1)細(xì)胞核　(2)維持培養(yǎng)液的pH　(3)核苷酸序列　HindⅢ和PstⅠ　(4)蛋白質(zhì)