高中生物 精講優(yōu)練課型 專題2 細胞工程 2.2.2 動物細胞融合與單克隆抗體同課異構課件 新人教版選修3.ppt
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2.2.2 動物細胞融合與單克隆抗體,一、動物細胞融合 1.概念: 是指___________________結合形成一個細胞的過程,也稱 _________。 2.誘導原理和結果: (1)誘導原理:_______________。 (2)誘導結果:形成_____細胞。,兩個或多個動物細胞,細胞雜交,細胞膜的流動性,雜交,3.誘導因素: 常用的誘導因素有______________、___________、_____等。 4.意義:突破了_________方法的局限,使_________成為可能。,聚乙二醇(PEG),滅活的病毒,電激,有性雜交,遠緣雜交,二、單克隆抗體 1.制備原理: (1)B淋巴細胞特點:一種B淋巴細胞分泌一種特異性抗體。 (2)骨髓瘤細胞特點:能在體外大量_____。 (3)雜交瘤細胞特點:B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合得到的雜 交瘤細胞,既能_________又能產生大量_________。,增殖,無限增殖,特定抗體,2.單克隆抗體的制備: 3.單克隆抗體的優(yōu)點:_________、_________、可大量制備。 4.單克隆抗體的應用: (1)作為_________,具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。 (2)用于_________和_________。,骨髓瘤,雜交瘤,特異性強,靈敏度高,診斷試劑,治療疾病,運載藥物,雜交瘤,單克隆,抗體,【微點撥】 1.誘導動物細胞融合與植物細胞雜交融合的方法有什么不同? 提示:動物細胞融合能用滅活的病毒進行誘導。 2.經促融處理后的細胞就是符合要求的雜交細胞嗎?哪種融合細胞才是符合要求的? 提示:不是。促融后可能會出現(xiàn)3種融合細胞:B-B融合細胞、瘤-瘤融合細胞、B-瘤融合細胞。其中B-瘤融合細胞(雜交瘤細胞)才是符合要求的細胞。,3.動物細胞完成融合的標志是什么? 提示:動物細胞融合時,先是細胞膜發(fā)生融合,然后是細胞核的融合。當兩個細胞核融合后形成具有單核的雜交細胞時,則標志著動物細胞融合的完成。 4.在制備單克隆抗體時,為什么不直接用經過免疫的B淋巴細胞(漿細胞)來獲得單克隆抗體,而需要與骨髓瘤細胞雜交后來獲??? 提示:用于獲得雜交瘤細胞的B淋巴細胞為漿細胞,是高度分化的動物細胞,培養(yǎng)時很難恢復分裂能力,不能進行無限增殖,獲得大量單克隆抗體。,1.動物細胞融合和植物原生質體融合決定于( ) A.細胞膜的流動性 B.細胞膜的選擇透過性 C.細胞質的流動性 D.細胞質中酶的活性 【解析】選A。動物細胞融合和植物原生質體融合決定于細胞膜的流動性。,2.基因型為Aa與基因型為Bb的動物體細胞,用滅活的病毒處理后,不可能獲得下列哪種基因型的細胞( ) A.AAaa B.AaBb C.Aabb D.BBbb 【解析】選C。誘導融合處理后可能會出現(xiàn)3種融合細胞,即同種細胞相互融合,基因型為AAaa和BBbb,不同種細胞相互融合,融合后的雜交細胞基因型為AaBb,C項基因型細胞不可能出現(xiàn)。,3.要想獲得大量的單克隆抗體就必須用單個的B淋巴細胞進行無性繁殖,形成細胞群。其原因是( ) A.在體外培養(yǎng)條件下,B淋巴細胞可以無限增殖 B.在動物體內B淋巴細胞可以產生多達百萬種以上的抗體 C.每一個B淋巴細胞都參與特異性免疫反應 D.每一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體 【解析】選D。B淋巴細胞的免疫具有特異性,即每一個B淋巴細胞只能產生一種與特定抗原結合的抗體。,4.科學家們用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合,得到雜交瘤細胞,經培養(yǎng)可產生大量的單克隆抗體,與骨髓瘤細胞融合的是 ( ) A.經過免疫的T淋巴細胞 B.未經過免疫的T淋巴細胞 C.經過免疫的B淋巴細胞 D.未經過免疫的B淋巴細胞 【解析】選C。B淋巴細胞接受抗原刺激后,形成漿細胞,才能產生抗體,所以只有經過免疫的B淋巴細胞才會產生專一性的抗體。,5.滅活的病毒的抗原性和感染能力是( ) A.失去抗原性,具有感染能力 B.具有抗原性,也具有感染能力 C.失去抗原性,也失去感染能力 D.具有抗原性,失去感染能力 【解析】選D。滅活的病毒不具有生物活性,不具有侵染細胞的能力,但具有抗原性,能夠促進動物細胞融合。,6.生物導彈是指( ) A.單克隆抗體 B.帶有特定藥物的單克隆抗體 C.雜交細胞 D.B淋巴細胞 【解析】選B。生物導彈用于定位殺死癌細胞,原理是利用抗癌細胞的單克隆抗體與放射性同位素、化學藥物或細胞毒素結合后注入體內,借助單克隆抗體的導向作用進行定位。,一、動物細胞融合 1.過程:,(1)融合過程:細胞膜融合→細胞質融合→細胞核融合。 (2)細胞膜融合的過程體現(xiàn)出細胞膜具有一定的流動性。 (3)融合后重組細胞的特點:融合形成的雜種細胞具有兩種細胞的遺傳信息,通過動物細胞培養(yǎng),雜種細胞表現(xiàn)出兩個親本細胞的特點。,2.植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較:,【易錯提醒】 (1)滅活是指利用物理或化學手段使病毒或細菌失去感染能力,但是并不破壞這些病原體的抗原結構。 (2)病毒在不同過程或操作中的“身份不同”。在免疫調節(jié)中病毒屬于抗原,在基因工程中可作為載體,在細胞工程中可作為誘導劑。 (3)動物細胞融合與植物體細胞雜交相似,形成的雜交細胞包含兩個親本的遺傳物質,其染色體數(shù)、基因組成、染色體組都是兩個細胞之和,將表現(xiàn)出兩個親本的遺傳特征。,1.(2014湛江高二檢測)下列關于動物細胞融合的說法,錯誤的是( ) A.動物細胞融合也稱細胞雜交,是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程 B.動物細胞融合需要用纖維素酶處理 C.動物細胞融合時需人工誘導 D.常用的誘導動物細胞融合的因素有:聚乙二醇、滅活的病毒、電激等,【解題關鍵】解答本題需關注以下兩點: (1)誘導動物細胞融合可以用滅活的病毒。 (2)植物體細胞雜交誘導融合前需要去除細胞壁,而動物細胞無細胞壁。,【解析】選B。動物細胞融合是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程。動物細胞無細胞壁,所以誘導融合前不需要用纖維素酶處理。動物細胞融合需要人工誘導融合,誘導因素包括聚乙二醇、滅活的病毒、電激等。,2.下圖所示為細胞融合技術的一些過程:,(1)從A細胞和B細胞到C細胞的過程中,采用的方法中與誘導植物原生質體融合不同的是 處理。 (2)若A、B細胞為單倍體煙草植物的體細胞,那么這樣的細胞已經用酶降解脫掉了 。這種酶可能是 、 ,由此形成的細胞經培養(yǎng)形成的細胞團稱為 。 (3)若將基因型為AaBB的番茄細胞與基因型為AAbb的番茄細胞融合,所形成細胞的基因型是 。 (4)若將染色體組成為2A+XX的人細胞與染色體組成為2B+XX的鼠細胞融合,培育成的人-鼠細胞的染色體組成是 。,【解題關鍵】解答本題要注意以下兩點: (1)理解植物細胞融合和動物細胞融合過程的異同點。 (2)雜種植物細胞中染色體來自兩個融合的親本細胞。,【解析】(1)動物細胞融合特有的方法是用滅活的病毒誘導融合。 (2)植物細胞有細胞壁,若A、B細胞為單倍體煙草植物的體細胞,那么這樣的細胞已經用纖維素酶和果膠酶脫掉了細胞壁;植物體細胞雜交獲得的雜種細胞,經脫分化形成愈傷組織。 (3)(4)細胞融合后的染色體或基因分別是兩種細胞的染色體或基因累加。,答案:(1)滅活的病毒 (2)細胞壁 纖維素酶 果膠酶 愈傷組織 (3)AAAaBBbb (4)2A+2B+2X+2X,【方法規(guī)律】生物工程技術產生后代個體的遺傳物質或基因來源 (1)轉基因生物:目的基因來自外源生物,絕大多數(shù)基因來自兩個親本。 (2)雜種植株:遺傳物質來自融合的兩個親本細胞。 (3)經細胞培養(yǎng)獲得的動物細胞:遺傳物質只來自一個親本。 (4)動物細胞融合形成的雜交細胞:遺傳物質來自融合的兩個親本細胞。 (5)克隆動物:細胞核中的遺傳物質來自供體動物,細胞質中的遺傳物質來自提供卵母細胞的動物個體。,二、單克隆抗體 1.技術手段:動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合。 2.制備過程:,3.比較制備單克隆抗體中的幾種細胞:,4.制備單克隆抗體的兩次篩選: 第一次篩選:由于細胞融合是隨機的,因此細胞混合物中融合細胞將以多種形式出現(xiàn),因此必須從中篩選出既能分泌抗體同時又能大量增殖的雜交瘤細胞。 第二次篩選:從雜交瘤細胞群中選出能產生專一抗體的特異性雜交瘤細胞。,【易錯提醒】 誘導融合的B淋巴細胞是經免疫產生的B淋巴細胞,未經免疫的B淋巴細胞不能產生抗體。,1.關于單克隆抗體制備過程的敘述,正確的是( ) A.可直接從動物體內獲取B淋巴細胞進行培養(yǎng) B.雜交瘤細胞具有B淋巴細胞和骨髓瘤細胞的雙重特點 C.用滅活病毒誘導融合后形成的融合細胞即可產生單克隆抗體 D.經選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細胞即可用于單克隆抗體的生產,【解題關鍵】明確制作單克隆抗體的步驟,誘導融合可能會產生多種融合細胞,但只有不同種細胞融合形成的雜交細胞才是符合要求的細胞。,【解析】選B。將骨髓瘤細胞與免疫后的B淋巴細胞融合,經過選擇性培養(yǎng)基的篩選得到雜交瘤細胞,并經專一抗體檢測后,培養(yǎng)能產生特定抗體的雜交瘤細胞,即可得到單克隆抗體。雜交瘤細胞具有骨髓瘤細胞無限增殖的特點和B淋巴細胞產生特異性抗體的特點。誘導融合后可能會形成三種融合細胞,即同種細胞融合(B-B融合細胞、瘤-瘤融合細胞)、不同種細胞融合(B-瘤融合細胞),故需要進一步篩選。,2.(2014徐州模擬)如圖表示用生物工程制備人抗A抗體的過程?;卮鹣铝袉栴}。,(1)人的紅細胞膜表面有具有識別作用的凝集原,其化學本質是 ;從免疫學角度看,這種凝集原是 。 (2)圖中細胞1是小鼠體內注入人A型血紅細胞后獲得的 細胞,這種細胞具有產生 的特點,但難以在體外培養(yǎng)。甲培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的細胞2,是從患骨髓瘤的小鼠體內獲取的骨髓瘤細胞,這種細胞在體外培養(yǎng)時能 ,但不會產生抗體。,(3)為了能充分發(fā)揮上述兩種細胞各自的特點,經特殊處理,在促細胞融合因子的作用下,使兩種細胞發(fā)生融合,形成圖中的細胞3,這種細胞稱為 。把它放在乙培養(yǎng)皿中進行培養(yǎng),則能產生大量的細胞群,這種方法稱為 。 (4)過程①的主要目的是 。通過過程②或③的培養(yǎng)方法能產生大量 抗體。,【解題關鍵】解答本題需注意兩點: (1)單克隆抗體的制備所用兩種細胞的特點。 (2)誘導動物細胞融合后需要經過兩次篩選。,【解析】(1)人紅細胞膜表面的凝集原具有特異性,化學本質是糖蛋白,從免疫學角度看,它是抗原。 (2)(3)免疫后的B淋巴細胞能產生特異性抗體,小鼠骨髓瘤細胞則可在培養(yǎng)條件下無限分裂、增殖,在選擇培養(yǎng)基中,只有免疫后的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合產生的雜交瘤細胞(細胞3)才同時具備分泌抗體的功能和保持細胞無限增殖兩種特征。 (4)過程①的主要目的是篩選出能產生單一抗A抗體的雜交瘤細胞,過程②或③分別是體內培養(yǎng)和體外培養(yǎng),以產生大量抗A單克隆抗體。,答案:(1)糖蛋白 抗原 (2)B淋巴 單一的抗A抗體(或單一的特異性抗體) 大量增殖 (3)雜交瘤細胞 克隆 (4)篩選出能產生單一抗A抗體的雜交瘤細胞 抗A單克隆,- 配套講稿:
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