微生物學(xué)沙門菌弧菌PPT課件

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第三節(jié) 沙門菌屬 (Salmonella),1.種類繁多（血清型超過(guò)2500個(gè))2.宿主范圍廣，多對(duì)動(dòng)物致病3.只對(duì)人類致病的占少數(shù) 傷寒沙門菌 甲型副傷寒沙門菌 肖氏傷寒沙門菌 希氏傷寒沙門菌4. 動(dòng)物沙門菌也可對(duì)人致病 鼠傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌 、腸炎沙門菌、鴨沙門菌,1,一、 生物學(xué)性狀,形 態(tài) 染 色,2,1.未接種細(xì)菌,3.分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、硫化氫陰性,2.分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫陰性,4.不分解乳糖、分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫,5.不分解乳糖、分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫,主要生化特性,3,4,5,主要沙門菌的生化特性,6,抗原結(jié)構(gòu)（O抗原、H抗原、Vi抗原）1、沙門菌“O”抗原--- 耐熱菌體抗原用阿拉伯?dāng)?shù)字 1、2、3、…表示（從1~67），實(shí)際上共有58種。不同沙門菌可有相同的O抗原，故將有共同O抗原沙門菌歸一群（組），共可分40多組。引起人類疾病的沙門菌，其O抗原大多屬于A~E組（P126 表10-5）。,,7,2、沙門菌“H”抗原--- 不耐熱鞭毛抗原H抗原分為第 1 相、第 2 相第 1 相特異性高，以英文小寫字母表示第 2 相特異性較低，以阿拉伯?dāng)?shù)字表示各組沙門菌可依H抗原不同分種、型，H 抗原為特異性抗原?；瘜W(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)。,,8,3、沙門菌“Vi”抗原--- 表面抗原少數(shù)沙門菌（傷寒桿菌等）新從病人體內(nèi)分離標(biāo)本常有表面抗原Vi---virulence 毒力Vi抗原可阻斷O抗原與相應(yīng)抗體的凝集，在細(xì)菌鑒定中應(yīng)予注意。Vi抗原可刺激機(jī)體產(chǎn)生低效價(jià)抗體，隨細(xì)菌清除，此抗體消失，故測(cè)定Vi抗體有利于檢出帶菌者。,9,二、致病性,1、侵襲力沙門菌有毒株經(jīng)口感染 小腸末端派伊爾淋巴結(jié)M細(xì)胞 被吞噬 在吞噬細(xì)胞內(nèi)增殖（不完全吞噬）,,,,致病物質(zhì),10,2、內(nèi)毒素 導(dǎo)致體溫升高、白細(xì)胞數(shù)變化等,,3、腸毒素 個(gè)別沙門菌可產(chǎn)生腸毒素（鼠傷寒），作用 與大腸桿菌、霍亂弧菌腸毒素相似，引起胃腸炎,,,致病物質(zhì),11,致病菌 傷寒沙門菌，副傷寒甲、乙等沙門 傳染源 病人、帶菌者（尤為重要） 傳播途徑 經(jīng)糞-口途徑傳播 易感者 人群普遍易感,所致疾病,1、腸熱癥（傷寒、副傷寒）,,12,血流（第？次菌血癥、內(nèi)毒素）,全身淋巴組織中大量增殖 （肝、脾、腎、骨髓）,傷寒沙門菌,,,腸粘膜局部淋巴組織中增殖,局部炎癥、癥狀,加重局部炎癥 潰瘍、穿孔,,,全身癥狀（發(fā)熱、不適、全身疼痛） 潛伏期/前驅(qū)期（病程第1周）,全身癥狀（稽留高熱 肝脾腫大等） 極期（病程第2-3周）,13,整個(gè)病期約一個(gè)月左右,少數(shù)患者病后帶菌（腸道內(nèi)、膽囊?guī)Ь┏蔀橹匾膫魅驹?感染后體內(nèi)有抗體產(chǎn)生，但對(duì)胞內(nèi)菌無(wú)免疫作用，常用抗體測(cè)定作為傷寒病的輔助診斷——肥達(dá)反應(yīng)。,細(xì)胞免疫逐漸增強(qiáng) 細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌被清除,逐步痊愈,病后免疫以細(xì)胞免疫為主，終身免疫,,14,因攝入大量（108）其它沙門菌污染食物后引起 潛伏期 6-12小時(shí) 主要表現(xiàn) 惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉、發(fā)熱持續(xù)3-5天,2、胃腸炎（食物中毒）,15,3、敗血癥,多見(jiàn)小兒及免疫功能低下者 病原菌為其它沙門菌（豬霍亂、鼠傷寒等） 可致全身感染，敗血癥、腦膜炎、骨髓炎、心內(nèi)膜炎等。局部胃腸炎少見(jiàn)。,4、無(wú)癥狀帶菌者,多見(jiàn)傷寒、副傷寒患者 帶菌部位 膽囊 與年齡性別關(guān)系密切,16,三、微生物學(xué)檢查,傷寒病人按病程不同取不同標(biāo)本,第一周,第二周起,病程全程,食物中毒者取排泄物、嘔吐物、可疑食物,敗血癥患者取血液,細(xì)菌的分離鑒定,標(biāo)本,血,尿、糞便,骨髓,17,細(xì)菌分離鑒定步驟,糞便、尿,增菌培養(yǎng),SS 中國(guó)蘭,挑取不發(fā)酵 乳糖菌落,,,,,血清學(xué)鑒定：直接玻片凝集,傷寒桿菌表現(xiàn)葡萄糖 +乳糖 —?jiǎng)恿? +H2S +/—,雙糖管,,18,19,用已知的傷寒桿菌“O” 、“H”抗原及副傷寒甲、乙的“H”抗原與不同稀釋度的病人血清作試管凝集試驗(yàn)。根據(jù)血清中抗體效價(jià)及動(dòng)態(tài)變化，可作為傷寒、副傷寒病人的輔助診斷試驗(yàn)。,血清學(xué)試驗(yàn) —— 肥達(dá)反應(yīng)（Widal test),概念,20,1、正常效價(jià) O抗體≤ 1:80 H抗體≤ 1:160PA抗體≤ 1:80 PB抗體≤ 1:80 2、病程中動(dòng)態(tài)觀察二份血清,第二次效價(jià)增長(zhǎng)四倍以上有意義 3、O、H抗體的區(qū)別O-Ab-IgM （特點(diǎn)）H-Ab-IgG （特點(diǎn)）,分析肥達(dá)反應(yīng)結(jié)果,21,▲ O、H均不增高——傷寒、副傷寒可能性小▲ O增高、H不增高——感染早期、其它沙門 菌感染▲O不增高、H增高——預(yù)防接種后、非特異性回憶 反應(yīng) ▲ O、H均增高——傷寒、副傷寒可能性大4、抗體始終不升高的可能因素早期使用抗生素、免疫功能低下等,22,例：發(fā)熱兩周后入院，肥達(dá)反應(yīng)結(jié)果如下,甲：O 1:160 H 1:80 PA 1:40 PB 1:40,乙 O 1:80 H 1:320 PA 1:40 PB 1:40,丙 O 1:160 H 1:80 PA 1:40 PB 1:320,丁 O 1:320 H 1:640 PA 1:40 PB 1:40,23,傷寒病人微生物檢查陽(yáng)性率,系列1-尿液中細(xì)菌培養(yǎng)；系列2-血液中細(xì)菌培養(yǎng)； 系列3-糞便中細(xì)菌培養(yǎng)；系列4-肥達(dá)反應(yīng)抗體效價(jià),陽(yáng) 性 率,病程：發(fā) 病 后 周 次,24,細(xì)菌培養(yǎng)（按前面步驟進(jìn)行） Vi抗體效價(jià)測(cè)定 Vi抗體 ≥ 1：10 有意義。,四、防治原則（了解）,▲ 預(yù)防接種：死菌苗、活菌苗（Ty21a株）,▲ 徹底治療病人及帶菌者,▲ 注意飲食衛(wèi)生，防止病從口入,傷寒帶菌者檢查,25,變形桿菌屬（簡(jiǎn)述 P181 ）,變形桿菌屬腸桿菌科 有周身鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑，培養(yǎng)基中遷徙生長(zhǎng) 能分解尿素（重要特征） 主要引起各種創(chuàng)傷感染、尿路感染等,變形桿菌的遷徙生長(zhǎng)現(xiàn)象,,26,變形桿菌的遷徙生長(zhǎng)現(xiàn)象,27,變形桿菌某些菌株的菌體抗原，與部分立克次體間有共同抗原成分。因此可用變形桿菌作為抗原與立克次體感染者血清做交叉凝集反應(yīng)，稱外裴試驗(yàn)（Weil-Felix test)——輔助診斷斑疹傷寒等疾病,外裴試驗(yàn),28,第11章 弧菌屬 (Vibrio),為一大群菌體彎曲呈弧狀的革蘭陰性菌主要特點(diǎn)：有單鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑培養(yǎng)要求為堿性環(huán)境自然界廣泛分布, 尤其是水體中，致病菌主要有霍亂弧菌、副溶血性弧菌。 與腸桿菌科不同的是氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性。,29,※自1817年已發(fā)生過(guò)7次世界性霍亂大流行，前6次由霍亂弧菌古典生物型引起，第7次由霍亂弧菌El Tor生物型引起。 ※霍亂弧菌古典生物型的發(fā)現(xiàn)與命名——1854年首次發(fā)現(xiàn)，1884年分離成功-Koch,,第一節(jié) 霍亂弧菌霍亂弧菌病原菌的發(fā)現(xiàn)與命名,30,※ EI Tor 弧菌的發(fā)現(xiàn)與命名——1905年在埃及EI Tor檢疫所檢出，當(dāng)時(shí)未發(fā)現(xiàn)與霍亂發(fā)病有關(guān)系。1961年確定為霍亂病原菌，命名為EI Tor 型霍亂弧菌※ 1992年出現(xiàn)新流行菌株O139，是目前在東南亞各國(guó)流行的主要病原菌，這是首次由非O1群霍亂弧菌引起的流行,霍亂弧菌病原菌的發(fā)現(xiàn)與命名,31,一、生物學(xué)性狀,■ 形態(tài)與染色G— 弧形，有單鞭毛，運(yùn)動(dòng)十分活潑。,霍亂弧菌 掃描電鏡 ×15000,,32,33,※營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基上 生長(zhǎng)良好。 ※ 耐堿怕酸— pH8.8~9.0 堿性蛋白胨水/堿性瓊脂平板。 ※霍亂弧菌可在無(wú)鹽的環(huán)境中生長(zhǎng)，其他弧菌不能。,,■ 培養(yǎng)特性,34,35,※霍亂弧菌具有 O 抗原、H 抗原 ※ O 抗原 目前發(fā)現(xiàn)的已有155個(gè)血清群，O1、O139群引起霍亂，其他血清群引起人類胃腸炎等疾病。 ※ O1群又可分為3個(gè)血清型。,■ 抗原構(gòu)造與分型,36,霍亂弧菌O1群血清型,37,■ 抗原構(gòu)造與分型,※根據(jù)表型差異，O1群霍亂弧菌的每一個(gè)血清型還可分為2個(gè)生物型。,38,39,40,,● 1992年在印度、盂加拉國(guó)暴發(fā)O139 群霍亂流行。O139 群在抗原性方面與O1 群無(wú)交叉。WHO規(guī)定， 霍亂的病原體包括O1群和O139 群霍亂弧菌,● O-1群 有3個(gè)血清型， 每一血清型均含有 二種生物型，古典生物型、 EI Tor 生物型, 二種生物型均可引起霍亂流行,41,■ 抵抗力,對(duì)酸、含氯的化學(xué) 消毒劑敏感 正常胃酸4 min 漂白粉：水= 1：4 ，1h,42,二、致病性,致病物質(zhì) 1、侵襲力鞭毛---穿透能力強(qiáng)，穿過(guò)腸道粘液層，有利于細(xì)菌粘附于腸壁上皮細(xì)胞。菌毛---定居因子，是細(xì)菌定居于小腸粘膜上皮細(xì)胞的重要因素。2、霍亂腸毒素,,43,44,45,霍亂腸毒素化學(xué)結(jié)構(gòu)與致病機(jī)理,,性質(zhì) 外毒素，是腸毒素的典型代表,結(jié)構(gòu) A+B亞單位構(gòu)成，A是毒性部分，B是運(yùn)載和保護(hù)部分,致病機(jī)理 B與腸粘膜上皮細(xì)胞受體(GM1) 結(jié)合，形成穿膜孔道 A進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)， 作用于細(xì)胞內(nèi)腺苷環(huán)化酶 細(xì)胞內(nèi) cAMP 分泌增多再吸收 劇烈吐泄,,,,,46,47,2、所致疾病------霍亂 傳染源 病人，帶菌者 傳播途徑 經(jīng)口傳播 人類為唯一易感者霍亂弧菌對(duì)酸敏感，正常胃酸可殺死細(xì)菌。 霍亂弧菌腸毒素作用后，引起劇烈腹瀉、嘔吐，典型病例大便為米泔水樣。病人可嚴(yán)重脫水、酸中毒；最終因循環(huán)衰竭，死亡。 未經(jīng)治療者死亡率高達(dá)50%~75%,48,3、免疫性,牢固的終身免疫 以體液免疫為主，出現(xiàn)保護(hù)性抗腸毒素抗體、抗菌抗體。 O139與O1 之間無(wú)交叉免疫：Ｏ抗原基因由rfb區(qū)域編碼，O139弧菌O抗原基因大部分缺失，使O-1菌苗對(duì)O139弧菌不起作用。,49,三、微生物學(xué)檢查,霍亂為烈性傳染病，傳播速度極快。 對(duì)首例病例要及時(shí)診斷，封鎖疫區(qū)，上報(bào)疫情。 一般根據(jù)病情診斷，必要時(shí)將可疑物密封保存于堿性蛋白胨水，送上級(jí)檢疫部門。,直接鏡檢-動(dòng)力、染色,,分離培養(yǎng)-堿性培養(yǎng)基,快速診斷-免疫熒光,血清學(xué)鑒定,,檢查步驟,,,,50,51,＊O1群霍亂弧菌死菌苗肌肉注射 ＊目前疫苗的研制轉(zhuǎn)向口服疫苗、基因 工程減毒活疫苗 ＊治療：補(bǔ)液、抗菌,防治原則,52,嘉興市秀城區(qū)某餐廳因承辦婚宴發(fā)生一起食物中毒事件。2004年4月28日中午12時(shí)左右，婚宴10桌，100人就餐。從當(dāng)日17時(shí)起，就餐人群開(kāi)始出現(xiàn)病人，至次日11時(shí)，中毒病人31人，罹患率為31％。癥狀主要為腹痛、腹瀉、惡心、嘔吐等胃腸道癥狀。副溶血性弧菌廣泛生存近岸海水和魚(yú)貝類等食物中，溫、熱地帶較多。我國(guó)華東沿海該菌的檢出率為57.4～66.5％，尤以夏秋季較高。海產(chǎn)魚(yú)蝦的帶菌率平均為45～48％，夏季可高達(dá)90％。腌制的魚(yú)貝類帶菌率也可達(dá)42.4％。,53,第五節(jié) 副溶血弧菌（了解）,副溶血弧菌（原名-嗜鹽弧菌） 主要引起疾病----食物中毒 特點(diǎn)： 細(xì)菌嗜鹽，易污染海產(chǎn)品，在海水中可存活50天。 培養(yǎng)要求3.5% 氯化鈉 潛伏期短，幾小時(shí)即可發(fā)病。癥狀嚴(yán)重，可有水樣、血水樣便?；謴?fù)較快。,54,TCBS培養(yǎng)基：顯示綠色菌落，非蔗糖發(fā)酵,55,,第12章 幽門螺桿菌（HP）,,G-桿菌，弧形、S形或螺旋狀 營(yíng)養(yǎng)要求高，生長(zhǎng)緩慢 尿素酶試驗(yàn)強(qiáng)陽(yáng)性 抵抗力弱，易產(chǎn)生耐藥性,生物學(xué)性狀,Helicobacter pylori，是螺桿菌屬的代表菌種,56,,,致病性,,感染普遍，糞-口傳播 與胃炎、十二指腸潰瘍及胃癌有關(guān) （1983年，澳大利亞皇家醫(yī)院內(nèi)科醫(yī)生馬歇爾、沃倫，2005年醫(yī)學(xué)諾貝爾獎(jiǎng)獲得者） 致病物質(zhì)及致病機(jī)制不詳,幽門螺桿菌,57,幽門螺桿菌,,微生物學(xué)檢查,,有創(chuàng)檢查 ①直接涂片②脲酶試驗(yàn)③分離培養(yǎng) 無(wú)創(chuàng)檢查 ①碳標(biāo)記呼吸試驗(yàn)②血清學(xué)試驗(yàn),傳統(tǒng)方法,新法 PCR、核酸探針技術(shù),治療 抗生素（聯(lián)用），痢特靈（呋喃唑酮）,58,Salmonella 沙門菌屬 Widal test 肥達(dá)反應(yīng) Vibrio 弧菌屬 V.cholera 霍亂弧菌 non-agglutinating Vibrio, NAG 不凝集弧菌,本章專業(yè)英語(yǔ)詞匯,59,了解主要沙門菌的生化反應(yīng)。 傷寒沙門菌的主要致病因素及傷寒發(fā)病過(guò)程。 何謂肥達(dá)反應(yīng)？如何觀察分析肥達(dá)反應(yīng)結(jié)果？ 弧菌屬的O抗原分型及與霍亂發(fā)病的關(guān)系。 霍亂弧菌的致病因素。 霍亂腸毒素的致病機(jī)理。,本 章 要 點(diǎn),60,