湖南省師大附中高中生物 DNA重組技術(shù)的基本工具課件 新人教版必修2

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1、1.1 DNA重組技術(shù)的基本工具重組技術(shù)的基本工具資料分析資料分析 位于費(fèi)城托馬斯位于費(fèi)城托馬斯杰斐遜大學(xué)的希拉杰斐遜大學(xué)的希拉里和她的同事成功地將人體狂犬病抗體里和她的同事成功地將人體狂犬病抗體的的DNA譯碼移入煙草作物中。譯碼移入煙草作物中。 轉(zhuǎn)基因煙草作物可以產(chǎn)生一種人體轉(zhuǎn)基因煙草作物可以產(chǎn)生一種人體蛋白質(zhì),而這種物質(zhì)能抗擊致命性的狂蛋白質(zhì),而這種物質(zhì)能抗擊致命性的狂犬病病毒。犬病病毒。 此轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)實(shí)現(xiàn)了哪種生物的哪此轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)實(shí)現(xiàn)了哪種生物的哪些性狀在另外哪種生物中表達(dá)?些性狀在另外哪種生物中表達(dá)?性狀的表達(dá)與我們從前學(xué)過(guò)的什么性狀的表達(dá)與我們從前學(xué)過(guò)的什么過(guò)程有關(guān)?過(guò)程有關(guān)?要實(shí)現(xiàn)

2、藥物基因在煙草中的表達(dá),要實(shí)現(xiàn)藥物基因在煙草中的表達(dá),要提前做哪些關(guān)鍵工作要提前做哪些關(guān)鍵工作? ?DNA重組技術(shù)的基本工具重組技術(shù)的基本工具 準(zhǔn)確切割準(zhǔn)確切割DNA的工具(的工具(“分子手術(shù)刀分子手術(shù)刀”)限制性內(nèi)切酶限制性內(nèi)切酶 DNA片段的連接工具(片段的連接工具(“分子縫合針?lè)肿涌p合針”)DNA連接酶連接酶 基因轉(zhuǎn)移工具(基因轉(zhuǎn)移工具(“分子運(yùn)輸車(chē)分子運(yùn)輸車(chē)”)基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體基因的大小以納米計(jì)算,要對(duì)它進(jìn)行剪切、基因的大小以納米計(jì)算,要對(duì)它進(jìn)行剪切、拼接等操作,沒(méi)有非常精細(xì)的工具是不行的。進(jìn)拼接等操作,沒(méi)有非常精細(xì)的工具是不行的。進(jìn)行基因操作最少需要以下三

3、種工具:行基因操作最少需要以下三種工具:思考思考 在自然界中有一些生物的在自然界中有一些生物的DNA可能進(jìn)入另一種生物的細(xì)可能進(jìn)入另一種生物的細(xì)胞中。我們有沒(méi)有學(xué)過(guò)相關(guān)的實(shí)例?胞中。我們有沒(méi)有學(xué)過(guò)相關(guān)的實(shí)例? 現(xiàn)今存在的生物為什么沒(méi)有在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中被外源現(xiàn)今存在的生物為什么沒(méi)有在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中被外源DNA的入侵而滅絕,仍能保持一種穩(wěn)定狀態(tài)?的入侵而滅絕,仍能保持一種穩(wěn)定狀態(tài)? 怎樣才能使外來(lái)的怎樣才能使外來(lái)的DNA失效從而保護(hù)自身?失效從而保護(hù)自身?思考思考從哪里可以找到這種切割外來(lái)的從哪里可以找到這種切割外來(lái)的DNA而對(duì)自身不切割的物質(zhì)?而對(duì)自身不切割的物質(zhì)?科學(xué)家是怎樣找到這種酶的?

4、科學(xué)家是怎樣找到這種酶的?這種酶具有什么作用?這種酶具有什么作用?限制性核酸內(nèi)切酶的作用:限制性核酸內(nèi)切酶的作用:1.能識(shí)別特定核苷酸序列;能識(shí)別特定核苷酸序列;2.從特定部位的兩個(gè)核苷酸之間切開(kāi)。從特定部位的兩個(gè)核苷酸之間切開(kāi)。限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶“分子手術(shù)刀分子手術(shù)刀”內(nèi)切酶切割內(nèi)切酶切割DNA厚形成的厚形成的末端末端黏性黏性末端、平末端末端、平末端是如何形成的?是如何形成的?重播重播DNADNA被限制酶切斷后有兩個(gè)反向互補(bǔ)的被限制酶切斷后有兩個(gè)反向互補(bǔ)的“黏黏性末端性末端”。被同一種限制切斷的幾個(gè)。被同一種限制切斷的幾個(gè)DNADNA具有相具有相同的黏性末端,能夠通過(guò)互補(bǔ)進(jìn)行配

5、對(duì)。同的黏性末端,能夠通過(guò)互補(bǔ)進(jìn)行配對(duì)?;虻尼樉€基因的針線DNADNA連接酶連接酶連接酶的作用是:將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性連接酶的作用是:將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性末端連接起來(lái),使之成為一個(gè)完整的末端連接起來(lái),使之成為一個(gè)完整的DNADNA分子。分子。切斷的切斷的DNA片段要與受體細(xì)胞的片段要與受體細(xì)胞的DNA連接,你覺(jué)得可以用什么酶?連接,你覺(jué)得可以用什么酶?DNA聚合酶和聚合酶和DNA連接酶有何連接酶有何相同和不同點(diǎn)?相同和不同點(diǎn)?閱讀思考閱讀思考 限制酶切割后有兩種不同的結(jié)果,限制酶切割后有兩種不同的結(jié)果,一種產(chǎn)生黏性末端,一種產(chǎn)生平末端。一種產(chǎn)生黏性末端,一種產(chǎn)生平末端。那么恢復(fù)它們的連接時(shí),

6、所用那么恢復(fù)它們的連接時(shí),所用DNA連連接酶是否可以不加選擇?接酶是否可以不加選擇?基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體 要讓一個(gè)從甲生物細(xì)胞內(nèi)取出來(lái)要讓一個(gè)從甲生物細(xì)胞內(nèi)取出來(lái)的基因在乙生物體內(nèi)進(jìn)行表達(dá),首的基因在乙生物體內(nèi)進(jìn)行表達(dá),首先得將這個(gè)基因送到乙生物的細(xì)胞先得將這個(gè)基因送到乙生物的細(xì)胞內(nèi)去!能將外源基因送入細(xì)胞的工內(nèi)去!能將外源基因送入細(xì)胞的工具就是載體。具就是載體。基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體假如目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不能復(fù)制將怎樣?假如目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不能復(fù)制將怎樣?作為載體沒(méi)有切割位點(diǎn)將怎樣?作為載體沒(méi)有切割位點(diǎn)將怎樣?目的基因是否進(jìn)入受體細(xì)胞,

7、你如何察覺(jué)?目的基因是否進(jìn)入受體細(xì)胞,你如何察覺(jué)?如果載體對(duì)受體細(xì)胞有害將怎樣?如果不能分離會(huì)怎如果載體對(duì)受體細(xì)胞有害將怎樣?如果不能分離會(huì)怎樣?樣?作為載體的必要條件作為載體的必要條件 能自我復(fù)制能自我復(fù)制 有切割位點(diǎn)有切割位點(diǎn) 能與目的基因結(jié)合能與目的基因結(jié)合 能進(jìn)入受體生物細(xì)胞并在受體生物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制能進(jìn)入受體生物細(xì)胞并在受體生物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并表達(dá);并表達(dá); 有遺傳標(biāo)記基因有遺傳標(biāo)記基因 對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害、容易分離對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害、容易分離 比較容易得到比較容易得到3 3、基因的運(yùn)輸工具、基因的運(yùn)輸工具運(yùn)載體運(yùn)載體能復(fù)制并帶著插能復(fù)制并帶著插入的目的基因一入的目的基因一起復(fù)制起復(fù)制有切割位點(diǎn)有切

8、割位點(diǎn)有標(biāo)記基因的存有標(biāo)記基因的存在,將來(lái)可用含在,將來(lái)可用含青霉素的培養(yǎng)基青霉素的培養(yǎng)基鑒別。鑒別。練習(xí)練習(xí)在基因工程中,切割運(yùn)載體和含有目的基因在基因工程中,切割運(yùn)載體和含有目的基因的的DNA片段,需使用(片段,需使用( )A. 同種限制酶同種限制酶 B. 兩種限制酶兩種限制酶C. 同種連接酶同種連接酶 D. 兩種連接酶兩種連接酶基因工程常用的受體細(xì)胞有(基因工程常用的受體細(xì)胞有( )(1)大腸桿菌大腸桿菌 (2)枯草桿菌)枯草桿菌(3)支原體)支原體 (4)動(dòng)植物細(xì)胞)動(dòng)植物細(xì)胞A. (3)()(4) B. (1)()(2)()(4)C. (2)()(3)()(4) D. (1)()(2)()(3)

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