微生物學第03章消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全ppt課件

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第五節(jié) 抑制或殺滅微生物的理化因素,1,消毒滅菌的常用術(shù)語,滅菌（sterilization）：殺滅物體上所有微生物的方法。包括細菌芽胞、病毒和霉菌在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。 消毒（disinfection）：殺死物體上或環(huán)境中的病原微生物、并不一定能殺死細菌芽胞或非病原微生物的方法。,2,防腐（antisepsis）：防止或抑制皮膚表面細菌生長繁殖的方法。 清潔（cleaning）：是指通過除去塵埃和一切污穢以減少微生物數(shù)量的過程。 無菌（asepsis）和無菌操作：無菌是無活菌的意思，多是滅菌的結(jié)果。防止細菌進入人體或其它物品的操作技術(shù)，稱為無菌操作。,3,消毒滅菌的方法,物理消毒滅菌法 化學消毒滅菌法,4,一、物理消毒滅菌法 （一）熱力滅菌法 1.干熱滅菌法 殺菌機制：使菌體脫水干燥、大分子變性。 殺菌條件：80~100℃ 1h可殺死繁殖體，160~170 ℃ 2h 可殺死芽胞。,5,常用方法,焚燒----最徹底的滅菌方法 燒灼----直接用火焰滅菌方法 干烤----加熱160-170℃ 2h,6,2. 濕熱滅菌法,殺菌機制：在水分子存在情況下更易于使菌體蛋白凝固，熱力穿透性更強。,常用方法,巴氏消毒法,煮沸消毒法,流通蒸汽消毒法,間歇蒸汽滅菌法,高壓蒸汽滅菌法,7,巴氏消毒法,概念 方法 用途,8,煮沸消毒法,原理 滅菌條件 應用范圍,9,流通蒸汽消毒法,原理 消毒條件 常用的器具,10,間歇蒸汽滅菌法,原理 方法 用途,11,高壓蒸汽滅菌法,原理 滅菌條件 應用范圍 注意,12,高壓蒸汽滅菌鍋,13,（二）輻射殺菌法 1.紫外線,殺菌波長 ：波長240～300nm的紫外線具有殺菌作用265～266nm殺菌能力最強。,殺菌機制：使胸腺嘧啶形成二聚體，干擾DNA的復制與轉(zhuǎn)錄。 特點：穿透力弱。 用途：空氣、物品表面消毒。 注意：紫外線對眼睛、皮膚有損傷作用,14,特點：穿透力強，不破壞營養(yǎng)。 適用：塑料、食品、藥品和生物制品消毒滅菌。 3.微波 使物品發(fā)熱。,2.電離輻射,殺菌機理：,產(chǎn)生游離基，破壞DNA,15,（三）濾過除菌法,原理,用物理阻留的方法除去液體或空氣中的細菌、真菌,以達到除菌目的。,濾菌器,含有微細小孔0.1～ 0.45微米,只允許液體或氣體通過,而大于孔徑的細菌等顆粒不能通過 。,用途,血清、毒素、抗生素以及藥液的除菌,,注意：病毒、支原體、某些L型細菌可以通過濾菌器,16,17,18,濾器和層流室,19,（四）干燥與低溫抑菌法 不耐干燥的微生物。 低溫一般不能殺死細菌。,冷凍真空干燥法：在低溫狀態(tài)下真空抽去水分,20,化學消毒滅菌法,消毒劑的種類 消毒劑的應用,酚類、醇類、重金屬鹽類、氧化劑、表面活性劑,人體體表、醫(yī)療器械、 周圍環(huán)境,21,（一）殺菌機制 1.促進菌體蛋白質(zhì)變性或凝固 to denaturate and coagulate proteins of bacterial cell 酚類--石碳酸、來蘇、洗必泰等。 醇類--70%～75%乙醇殺菌力最強。 重金屬鹽類--紅汞等。 烷化劑--甲醛等，殺菌力強，但毒性大，有致癌性。,22,2.干擾細菌的酶系統(tǒng)和代謝 to interfere enzymatic system and metabolism of bacterium,氧化劑---過氧化氫、高錳酸鉀 等，與細菌的酶結(jié)合使之失去活 性。過氧乙酸 對細菌繁殖體和芽胞、真菌、病毒都有殺滅作用。,23,3.損傷菌細胞膜 to damage cell membrance of bacterium,表面活性劑、脂溶劑：增加菌細胞表面張力，并增加其通透性使細菌破裂。 注意：大多對人體組織有害，只能外用或環(huán)境消毒。,24,（二）消毒劑的應用,25,（三）化學消毒劑按其殺菌能力分三大類,1.高效消毒劑 （high-level disinfectants） ①含氯消毒劑（次氯酸鈉、二氯異氰酸尿酸鈉和漂白粉）②過氧化物消毒劑（過氧化氫、過氧乙酸） ③醛類消毒劑 （戊二醛、甲醛） ④環(huán)氧乙烷 2.中效消毒劑 （intermediate-level disinfectants） ①含碘消毒劑（碘酊、碘伏） ②醇類消毒劑（乙醇、異丙醇） 3.低效消毒劑 （low-level disinfectants） ①季銨鹽類 （苯扎溴銨） ②氯已定 ③高錳酸鉀,26,固體二氧化氯消毒劑,27,消毒滅菌的運用,1.高危器械物品 用時需進入無菌組織的物品。所有這些物品都應該滅菌。如針頭、注射器、手術(shù)器械、注射液體、敷料、靜脈導管和尿道插管等。 2.中危器械物品 用時不進入無菌組織，但接觸黏膜的器械。采用消毒即可。如呼吸機、麻醉機、胃鏡、支氣管鏡、陰道窺器、體溫計和口腔器械等等。,（一）醫(yī)療器械物品的消毒滅菌,28,3.低危器械物品 只接觸未損傷皮膚,但不進入無菌組織和不接觸黏膜的物品。一般用后清洗、消毒即可。如治療盤、治療車、食品器皿、便盆等。 4.快速周轉(zhuǎn)的醫(yī)療器械 醫(yī)療工作中需要快速周轉(zhuǎn)的關(guān)鍵和半關(guān)鍵器材。如纖維內(nèi)窺鏡、牙鉆、牙科手術(shù)器械等。,29,（二）室內(nèi)空氣消毒滅菌 1.物理消毒法 ①紫外線照射（1.5W/m3，1h）最常用；②濾過除菌：空氣通過孔徑小于0.2μm的高效過濾裝置以除去細菌和帶菌塵埃。 2．化學消毒法 包括化學消毒劑噴霧和熏蒸①過氧乙酸噴霧、熏蒸；②過氧化氫噴霧；③二氧化氯溶液噴灑；④中草藥點燃煙熏。 （三）手和皮膚的消毒 人體手上的細菌可分為暫住菌和常住菌兩大類。用肥皂和流動水經(jīng)常并正確洗手 病原微生物污染時應用消毒劑消毒。常用的有75%酒精、0.2%過氧乙酸、0.4 %～0.5 %氯已定溶液等。,30,（四）黏膜的消毒 口腔黏膜3%過氧化氫、尿道、陰道、膀胱0.1%～0.5%氯已定。 （五）病人排泄物與分泌物的消毒滅菌 50g∕L次氯酸鈉、漂白粉等。 （六）病人污染物品的消毒 日常生活用具：煮沸、 0.5%過氧乙酸浸泡。 家具： 0.2 %～0.5 %過氧乙酸。 （七）飲水的消毒 自來水：氯氣、漂白粉。 （八）環(huán)境的消毒,31,影響消毒滅菌效果的因素,一、微生物的種類 二、微生物的物理狀態(tài) 三、微生物的數(shù)量 四、消毒劑性質(zhì)、濃度與作用時間 五、溫度 六、酸堿度 七、有機物,32,病原微生物實驗室生物安全,生物安全（biosafety）是生物技術(shù)安全（safety of biotechnology）的簡稱。 狹義地指現(xiàn)代生物技術(shù)的研究、開發(fā)、應用及轉(zhuǎn)基因生物可能對生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人類健康產(chǎn)生潛在的危害。 廣義地指與生物有關(guān)的各種因素對社會、經(jīng)濟、人類健康及生態(tài)環(huán)境所產(chǎn)生的危害或潛在風險。,33,病原微生物所致的安全問題，如病原微生物實驗室的安全隱患、生物武器、生物恐怖、重大傳染病的暴發(fā)流行等，也是人類社會所面臨的最現(xiàn)實的生物安全問題。 病原微生物實驗室生物安全的核心是防擴散和防感染。 關(guān)于病原微生物實驗室生物安全，我國法令包括對病原微生物的分類管理，對實驗室的分級管理，實驗室感染的控制以及監(jiān)督和法律責任等。,34,一、病原微生物的分類,根據(jù)傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度，病原微生物分為四類： 第一類是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。 第二類是指能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。,35,一、病原微生物的分類,第三類是指能夠引起人或動物疾病，但一般情況下對人、動物或環(huán)境不構(gòu)成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物。 第四類是指在通常情況下不會引起人或動物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。 第一類、第二類統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。,36,二、病原微生物實驗室的分級,37,一、二級實驗室不得從事高致病性病原微生物實驗活動。三級、四級實驗室從事高致病性病原微生物實驗活動。 從事高致病性病原微生物相關(guān)實驗活動應當有２名以上的工作人員共同進行。在同一個實驗室的同一個獨立安全區(qū)域內(nèi)，只能同時從事一種高致病性病原微生物的相關(guān)實驗活動。應有健全安全保衛(wèi)制度 。,38,實驗室工作人員應掌握實驗室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)程、生物安全防護知識和實際操作技能。應有符合要求的防護用品，應建立健康檔案；進行預防接種。 實驗室應有科學、嚴格的管理制度，定期對實驗室設(shè)施設(shè)備、材料等進行檢查、維護和更新，應對廢水、廢氣以及其他廢物進行合理處置，防止環(huán)境污染。,39,生物安全,,40,三、實驗室感染的控制以及監(jiān)督和法律責任,實驗室感染控制工作包括定期檢查實驗室的生物安全防護、病原微生物菌（毒）種和樣本保存與使用、安全操作、實驗室排放的廢水和廢氣以及其他廢物處置等實施情況。 實驗室發(fā)生高致病性病原微生物泄漏時，預防、控制措施包括：①封閉被病原微生物污染的實驗室或可能造成病原微生物擴散的場所；②開展流行病學調(diào)查；③對病人進行隔離治療，對相關(guān)人員進行醫(yī)學檢查；④對密切接觸者進行醫(yī)學觀察；⑤進行現(xiàn)場消毒；⑥對染疫或者疑似染疫的動物采取隔離、撲殺等措施。,41,監(jiān)督的主要內(nèi)容是監(jiān)督病原微生物實驗室執(zhí)行國家有關(guān)法律、行政法規(guī)、國家標準和要求的記錄、檔案及報告的情況。 法律責任的核心是承擔造成傳染病傳播、流行或者其他嚴重后果的法律責任。,42,思考題,常用的消毒劑有哪些種類? 簡述化學消毒劑的殺菌機制。 濕熱滅菌有哪些方法? 各有何用途? 筒述紫外線殺菌的作用機制和注意事項。 在溫度和時間相同的情況下，為什么濕熱滅菌法的效果比干熱法好? 當從事病原生物學安全實驗室工作時，應考慮哪些與生物安全相關(guān)的問題？,43,