高中生物 專題一《基因工程的基本操作程序》教學(xué)設(shè)計(jì) 新人教版選修31
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《基因工程的基本操作程序》 教學(xué)目標(biāo) 1.簡(jiǎn)述基因工程原理及基本操作程序。 2.嘗試設(shè)計(jì)某一轉(zhuǎn)基因生物的研制過(guò)程。 3.培養(yǎng)學(xué)生探索科學(xué)的嚴(yán)謹(jǐn)態(tài)度 教學(xué)重難點(diǎn) 【教學(xué)重點(diǎn)】 基因工程基本操作程序的四個(gè)步驟。 【教學(xué)難點(diǎn)】 (1)從基因文庫(kù)中獲取目的基因。 (2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。 教學(xué)工具 多媒體 教學(xué)過(guò)程 復(fù)習(xí)提問: 1.DNA重組技術(shù)的基本工具有那些,各自的作用和特點(diǎn)是什么? 2.我們所學(xué)過(guò)的育種方法有那些?其中基因工程育種有那些優(yōu)點(diǎn)? 導(dǎo)入:通過(guò)基因工程的概念我們可知,我們能夠應(yīng)用DNA重組技術(shù)和轉(zhuǎn)基因技術(shù)賦予生物以新的遺傳特征,但是無(wú)論是DNA重組技術(shù)還是轉(zhuǎn)基因技術(shù)都需要找到對(duì)我們有利的目的基因,我們?cè)撊绾稳ふ夷康幕蚰?,目的基因又將如何連接到載體上哪,以及如何將載體導(dǎo)入受體?這些都是我們所要共同探究的問題!現(xiàn)在讓我們共同學(xué)習(xí)一下1.2基因工程的基本操作。 思考1.我們?cè)谇懊嫣岬降奶K云芽孢桿菌中的抗蟲基因、胰島素基因、干擾素基因等都可以作目 的基因??墒且诤棋摹盎蚝Q蟆敝?,找到特定的目的基因可以用什么樣的方法和途徑呢? 2、基因工程的基本操作程序主要包括: 、 、 新課教學(xué): 基因工程的基本操作步驟主要包括:目的基因的獲??;基因表達(dá)載體的構(gòu)建;將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞;目的基因的檢測(cè)與鑒定。 一.目的基因的獲取 1.目的基因:主要是指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。 2.目的基因的獲取方法: (1)從基因文庫(kù)中獲取 基因文庫(kù):將含有某種生物不同基因的許多DNA片段,導(dǎo)入受體菌的群體儲(chǔ)存,各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因。 構(gòu)建基因文庫(kù)的目的:為了在不知目的基因序列的情況下,便于獲得所需的目的基因。 基因組文庫(kù):含有一種生物的所有基因。 部分基因文庫(kù)(如cDNA文庫(kù)):含部分基因,可由mRNA反轉(zhuǎn)錄而來(lái)。 (2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 PCR:是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。 原理:DNA雙鏈復(fù)制 原料:模板DNA;RNA引物;四種脫氧核苷酸;熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶);離子 方法:DNA受熱變性解旋為單鏈、冷卻后RNA引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合、DNA聚合酶作用下延伸合成互補(bǔ)鏈。 特點(diǎn):指數(shù)形式擴(kuò)增 二.基因表達(dá)載體的構(gòu)建 1.目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在;可以遺傳給下一代;使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。 目的基因: 2.基因表達(dá) 啟動(dòng)子:位于基因首端,RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位, 驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄基因 載體的組成 終止子:位于基因尾端,使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停下來(lái) 標(biāo)記基因:鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因 3.方法:同種限制酶分別切割載體和目的基因,再用DNA連接酶把兩者連接。 目的基因與運(yùn)載體結(jié)合(以質(zhì)粒為運(yùn)載體) 4.條件:同種限制酶、DNA連接酶、ATP(目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因) 三.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 轉(zhuǎn)化:目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程。 ① 導(dǎo)入植物細(xì)胞:農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌,再讓農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞) 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 ②導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞:顯微注射法(將基因表達(dá)載體提純,用顯微儀注射到受精卵中) ③導(dǎo)入微生物細(xì)胞:Ca2+處理受體細(xì)胞成為感受態(tài)細(xì)胞,再進(jìn)行混合。 提示:農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理是利用農(nóng)桿菌(胞內(nèi)寄生菌)對(duì)植物的感染而把目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。 四.目的基因的檢測(cè)和鑒定 ①檢測(cè)是否插入目的基因,利用DNA分子雜交技術(shù),目的基因DNA一條 鏈(作探針)與受體細(xì)胞中提取的DNA雜交,看是否有雜交帶。 ②檢測(cè)是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,利用DNA分子雜交技術(shù),目的基因DNA一條鏈(作探針)與受體細(xì)胞中提取的mRNA雜交,看是否有雜交帶。 ③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)??贵w與蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原-抗體雜交,看是否有雜交帶。 ④還可以進(jìn)行個(gè)體水平的鑒定,根據(jù)其性狀。 提示:①DNA分子雜交技術(shù)首先提取受體細(xì)胞中的DNA,然后高溫解成單鏈,再與同位素標(biāo)記的DNA探針雜交;②抗原-抗體雜交所用到的抗體是用表達(dá)出的蛋白質(zhì)注射動(dòng)物進(jìn)行免疫,產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,并提取出而來(lái)的。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 課后小結(jié) 本節(jié)學(xué)習(xí)的基因工程的基本操作程序和方法是對(duì)轉(zhuǎn)基因植物、動(dòng)物、微生物的概括。如果在本課將要結(jié)束時(shí),做個(gè)練習(xí),帶領(lǐng)學(xué)生結(jié)合設(shè)計(jì)某一轉(zhuǎn)基因生物的具體過(guò)程,可將基因工程操作程序有機(jī)地串起來(lái),從而加深對(duì)這一程序的認(rèn)識(shí)。例如,煙草是人類健康的“殺手”。如果讓它生產(chǎn)出人類需要的藥物蛋白,應(yīng)如何操作?通過(guò)這一實(shí)例引導(dǎo)學(xué)生結(jié)合目的基因從何而來(lái),表達(dá)載體如何構(gòu)建,如何導(dǎo)入煙草,如何檢測(cè)藥物蛋白產(chǎn)生與否等問題加以設(shè)計(jì)??杉由顚W(xué)生對(duì)基因工程原理的理解。不同學(xué)生會(huì)有不同的方法,讓學(xué)生通過(guò)相互比較,相互借鑒,達(dá)到相互學(xué)習(xí)的目的。學(xué)生在課下還可查閱《科學(xué)》雜志等參考讀物,了解科學(xué)家成功的做法。 課后習(xí)題 1.基因工程的正確操作步驟是( ) ①使目的基因與載體相結(jié)合 ②將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 ③驗(yàn)證目的基因的表達(dá)是否符合特定性狀要求 ④提取目的基因 A.③②④① B.②④①③ C.④①②③ D.③④①② 解析:選C。在基因工程操作中,首先要提取目的基因,然后使目的基因與載體結(jié)合,再將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,最后是目的基因的檢測(cè)與表達(dá)。 2.下列獲取目的基因的方法中需要模板的是( ) ①?gòu)幕蛭膸?kù)中獲取目的基因?、诶肞CR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 ③反轉(zhuǎn)錄法?、芡ㄟ^(guò)DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成DNA A.①②③④ B.①②③ C.②③④ D.②③ 解析:選D。PCR技術(shù)利用的是DNA雙鏈復(fù)制原理。即將DNA雙鏈之間的氫鍵打開,變成單鏈DNA,作為聚合反應(yīng)的模板。反轉(zhuǎn)錄法是以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使RNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,先反轉(zhuǎn)錄形成互補(bǔ)的單鏈DNA,再合成雙鏈DNA。①④則均不需要模板。 3.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。PCR過(guò)程一般經(jīng)歷下述30多次循環(huán):95℃下使模板DNA變性、解鏈→55 ℃下復(fù)性(引物與DNA模板鏈結(jié)合)→72℃下引物鏈延伸(形成新的脫氧核苷酸鏈)。下列有關(guān)PCR過(guò)程的敘述中不正確的是( ) A.變性過(guò)程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對(duì)之間的氫鍵,也可利用解旋酶實(shí)現(xiàn) B.復(fù)性過(guò)程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對(duì)原則完成 C.延伸過(guò)程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸 D.PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需酶的最適溫度較高 解析:選C。本題考查PCR擴(kuò)增過(guò)程。解題的關(guān)鍵是要全面理解PCR擴(kuò)增過(guò)程。DNA分子被破壞是指DNA分子被解旋成兩條長(zhǎng)鏈,破壞的部位是連接兩條長(zhǎng)鏈之間的氫鍵,方法有多種,用解旋酶、高溫等都可使DNA解旋。B項(xiàng)中引物有兩種,分別與模板DNA鏈3′端的互補(bǔ)序列互補(bǔ)配對(duì)。C項(xiàng)中的原料不正確,合成DNA的原料是四種脫氧核苷酸。PCR技術(shù)中DNA合成過(guò)程中的溫度在70~75℃。 板書 1.2 基因工程的基本操作程序 一、 目的基因的獲取 二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建 (基因工程的核心) 三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 四、目的基因的檢測(cè)和鑒定- 1.請(qǐng)仔細(xì)閱讀文檔,確保文檔完整性,對(duì)于不預(yù)覽、不比對(duì)內(nèi)容而直接下載帶來(lái)的問題本站不予受理。
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