啟東市高中生物專題5DNA和蛋白質技術課題2多聚酶鏈式反應擴增DNA片段練習（打包6套）新人教版.zip

啟東市高中生物專題5DNA和蛋白質技術課題2多聚酶鏈式反應擴增DNA片段練習（打包6套）新人教版.zip,啟東市,高中生物,專題,DNA,蛋白質,技術,課題,多聚酶,鏈式反應,擴增,片段,練習,打包,新人 基礎知識：PCR的反應過程 1． 在PCR反應中，只有一個DNA的片段作為模板，經(jīng)過一次循環(huán)后，含引物Ⅰ的DNA單鏈占DNA總鏈數(shù)的(　　) A．1/2 B.1/4 C.1 D.1/8 2． 多聚酶鏈式反應(PCR)是一種體外迅速擴增DNA片段的技術。請回答下列問題： (1)DNA的兩條鏈是反向平行的，通常將 的末端稱為5，端，當引物與DNA母鏈通過堿基互補配對結合后，DNA聚合酶就能從引物的 開始延伸DNA鏈。 (2)PCR利用了DNA的熱變性原理解決了打開DNA雙鏈的問題，但又導致了DNA聚合酶失活的新問題。到20世紀80年代，科學家從一種Taq細菌中分離到 ，它的發(fā)現(xiàn)和應用解決了上述問題。要將Taq細菌從其它普通的微生物中分離出來。所用的培養(yǎng)基叫 。 (3)PCR的每次循環(huán)可以分為 三步。假設在PCR反應中，只有一個DNA片段作為模板，請計算在5次循拜后，反應物中大約有 個這樣的DNA片段。 (4)簡述PCR技術的主要應用(要求答2項)___________________________________________ _____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 3． 在PCR擴增循環(huán)過程中，下列說法正確的是（　　） A．在每次循環(huán)中，變性所用的時間是一樣多的 B．在每次循環(huán)中，復性所用的時間是一樣多的 C．在每次循環(huán)中，延伸所用的時間是一樣多的 D．以上說法都不正確 4． PCR技術的操作步驟依次是（　?。?A．高溫變性、中溫延伸、低溫退火 B．高溫變性、低溫退火、中溫延伸 C．中溫延伸、高溫變性、低溫退火 D．中溫延伸、低溫退火、高溫變性 5． 分離血紅蛋白溶液時，離心后試管的溶液分四層，血紅蛋白在第(　　)層。 A．一 B．二 C．三 D．四 6． 在血紅蛋白的整個提取過程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是(　　) A．防止血紅蛋白被氧化 B．血紅蛋白是一種兩性物質，需要酸中和 C．磷酸緩沖液會加速血紅蛋白的提取過程 D．讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內(nèi)，維持其結構和功能 7． 在PCR的實驗操作中,下列說法正確的是(　　) ①PCR所用的緩沖液和酶要在常溫下儲存 ②離心管的蓋子一定要蓋嚴 ③用手指輕彈離心管壁 ④離心的目的是使反應液集中在離心管的底部 A．①②③ B.①②④ C.②③④ D.①③④ 8． PCR過程與細胞內(nèi)的DNA復制過程相比,主要有兩點不同,它們是(　　) ①PCR過程需要的引物是人工合成的單鏈DNA或RNA ②PCR過程不需要DNA聚合酶 ③PCR過程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通過對反應溫度的控制來實現(xiàn)的 ④PCR過程中,DNA不需要解旋,直接以雙鏈DNA為模板進行復制 A．③④ B.①② C.①③ D.②④ 9． PCR技術的操作步驟依次是（ ） A．高溫變性、中溫延伸、低溫復性 B. 高溫變性、低溫復性、中溫延伸 C．中溫延伸、高溫變性、低溫復性 D. 中溫延伸、低溫復性、高溫變性 10． 關于DNA粗提取與鑒定實驗的有關說法正確的是（ ） ??????????? 充分溶解DNA的鹽溶液是0.14mol/L的NaCl溶液 ??????????? 實驗中提取較純凈的DNA利用了DNA不溶于酒精的特點 ??????????? 對最后提取出DNA用二苯胺試劑鑒定時需用酒精燈直接加熱 ??????????? 實驗操作過程中先后兩次加入蒸餾水的作用相同 參考答案： 1． 答案： B 解析： 經(jīng)過一次循環(huán)后，DNA單鏈共4條，含引物Ⅰ的DNA單鏈只有1條。 2． 答案： ⑴磷酸基團 3‘端 ⑵耐高溫的TaqDNA聚合酶 選擇培養(yǎng)基 ⑶變性、復性和延伸 32 ⑷遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學、基因克隆和DNA序列測定等（要求答2項） 解析： 本題考查PCR技術有關知識。DNA的兩條鏈是反向平行的，通常將含有游離的磷酸基團的末端稱為5，端，而DNA聚合酶從引物的3‘開始延伸DNA鏈；在體外擴增DNA時不用解旋酶而是用熱變性處理的方法打開DNA雙鏈，因此需要使用耐高溫的DNA聚合酶；PCR的每次循環(huán)可以分為變性、復性和延伸三個步驟，五次循環(huán)后得到25個DNA片段。PCR技術有廣泛的應用，可以用于遺傳疾病的診斷、刑偵破案、克隆基因等方面。 3． 答案： D 解析： ? 4． 答案： B 解析： PCR技術的操作步驟依次是：高溫變性、低溫退火、中溫延伸。 5． 答案： 　C 解析： 　分離血紅蛋白溶液時，離心后可明顯觀察到試管中液體分四層，從上向下數(shù)依次為：無色透明的甲苯層，白色薄層固體(脂溶性物質的沉淀層)、紅色透明液體(血紅蛋白水溶液)、暗紅色沉淀物(其他雜質)，故血紅蛋白分布于第三層。 6． 答案： 　D 解析： 　利用磷酸緩沖液模擬細胞內(nèi)pH環(huán)境，保證血紅蛋白的正常結構和功能，便于分離觀察和研究。 7． 答案： C 解析： PCR所用的緩沖液和酶需裝成小份,并在-20℃儲存;蓋嚴離心管口的蓋子,防止實驗中外源DNA污染;用手指輕輕彈擊管的側壁,使反應液混合均勻;離心的目的是使反應液集中在離心管的底部,提高反應效果。 8． 答案： C 解析： PCR過程與細胞內(nèi)的DNA復制過程相比較,主要有兩點不同:(1)PCR過程需要的引物是人工合成的單鏈DNA或RNA,長度通常為20~30個核苷酸。(2)PCR過程中,DNA解旋不依賴解旋酶,而是通過對反應溫度的控制來實現(xiàn)的 9． 答案： B 10． 答案： B 3