2019年高中生物 血紅蛋白的提取和分離雙基限時練 新人教版選修1.doc
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2019年高中生物 血紅蛋白的提取和分離雙基限時練 新人教版選修1 一、選擇題 1.凝膠色譜法所用的凝膠的化學(xué)本質(zhì)大多是( ) A.糖類化合物 B.脂質(zhì) C.蛋白質(zhì) D.核酸 解析 在用于蛋白質(zhì)分離的凝膠色譜法中所用凝膠是一些微小的多孔球體,它們多是由多糖類化合物構(gòu)成的。 答案 A 2.分離血紅蛋白溶液時,離心后試管的溶液分四層,血紅蛋白在第________層( ) A.一 B.二 C.三 D.四 解析 分離血紅蛋白溶液時,離心后可明顯觀察到試管中液體分四層,從上向下數(shù)依次為:無色透明的甲苯層,白色薄層固體(脂溶性物質(zhì)的沉淀層)、紅色透明液體(血紅蛋白水溶液)、暗紅色沉淀物(其他雜質(zhì)),故血紅蛋白分布于第三層。 答案 C 3.________的蛋白質(zhì)能進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道( ) A.相對分子質(zhì)量大的 B.吸附性高的 C.相對分子質(zhì)量小的 D.溶解度低的 解析 由多糖類化合物構(gòu)成的凝膠是微小的多孔球體,球體內(nèi)有許多貫穿的通道,相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)易進(jìn)入通道,路程較長,移動速度慢。 答案 C 4.下列試劑可用于血紅蛋白釋放的是( ) ①0.9%的生理鹽水?、诩妆健、哿姿峋彌_液?、苷麴s水?、輽幟仕徕c A.②④ B.①④ C.④⑤ D.①③ 解析 甲苯作用為溶解,脂類物質(zhì),也有利于紅細(xì)胞破裂和血紅蛋白的釋放,蒸餾水作用是使紅細(xì)胞吸水漲破。 答案 A 5.洗滌紅細(xì)胞時,離心所采用的方法是( ) A.低速長時間離心 B.低速短時間離心 C.高速長時間離心 D.高速短時間離心 解析 洗滌紅細(xì)胞時,轉(zhuǎn)速要低,時間要短,否則白細(xì)胞會與之一起沉淀,達(dá)不到分離目的。 答案 B 6.下列各項中,一般不影響凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)中的分離度的是( ) A.層析柱高 B.層析柱的直徑 C.緩沖溶液 D.樣品的分布 解析 分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱必須有適宜的高度,分離度與柱高相關(guān)。樣品的分布也影響分離度,緩沖溶液的pH影響蛋白質(zhì)所帶的電荷,因此也影響分離度。只有層析柱的直徑一般不會影響分離度。 答案 B 7.在蛋白質(zhì)的提取和分離中,關(guān)于對樣品處理過程中,分析無誤的是( ) A.洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無機(jī)鹽 B.洗滌時離心速度過小,時間過短,白細(xì)胞等會沉淀,達(dá)不到分離的效果 C.洗滌過程選用0.1%的生理鹽水 D.透析的目的是去除樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) 解析 洗滌紅細(xì)胞目的是使血漿中血漿蛋白、白細(xì)胞等與紅細(xì)胞分離,如果洗滌次數(shù)過少,無法除去血漿蛋白,如離心速度過高和時間過長,會使白細(xì)胞等一同沉淀,達(dá)不到分離的效果,洗滌時選用0.9%的生理鹽水。 答案 D 8.蛋白質(zhì)的提取和分離分為哪幾步( ) A.樣品處理,凝膠色譜操作、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳 B.樣品處理、凝膠色譜操作、純化 C.樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定 D.樣品處理、純化、粗分離、純度鑒定 解析 蛋白質(zhì)的提取和分離分為樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定四步。A中凝膠色譜操作及SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳為實驗操作過程中的技術(shù)。 答案 C 9.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法中加入SDS的作用是( ) A.增大蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量 B.改變蛋白質(zhì)的形狀 C.掩蓋不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別 D.減少蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量 解析 SDS的作用是使蛋白質(zhì)完全變性,SDS所帶負(fù)電荷量大大超過蛋白質(zhì)分子原有的電荷量,因而掩蓋不同種類蛋白質(zhì)間電荷差別。 答案 C 10.在血紅蛋白的整個提取過程中,不斷用磷酸緩沖液處理的目的是( ) A.防止血紅蛋白被氧化 B.血紅蛋白是一種兩性物質(zhì),需要酸中和 C.磷酸緩沖液會加速血紅蛋白的提取過程 D.讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內(nèi),維持其結(jié)構(gòu)和功能 解析 利用磷酸緩沖液模擬細(xì)胞內(nèi)pH環(huán)境,保證血紅蛋白的正常結(jié)構(gòu)和功能,便于分離觀察和研究。 答案 D 11.使用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時,洗滌紅細(xì)胞、釋放血紅蛋白和透析過程中,分別使用下列哪些試劑( ) ①蒸餾水 ②生理鹽水?、?0 mmol/L的磷酸緩沖液?、芮逅、輽幟仕徕c A.①③⑤ B.①②③ C.②①③ D.④①③ 解析 在分離蛋白質(zhì)時,用生理鹽水洗滌紅細(xì)胞,以去除雜蛋白,然后將其加入蒸餾水中使紅細(xì)胞破裂,釋放血紅蛋白,透析需用磷酸緩沖液,以維持pH穩(wěn)定。 答案 C 12.關(guān)于血紅蛋白分子組成的敘述正確的是( ) A.兩條α-肽鏈、兩條β-肽鏈、一個亞鐵血紅素基團(tuán) B.一條α-肽鏈、三條β-肽鏈、四個亞鐵血紅素基團(tuán) C.兩條α-肽鏈、兩條β-肽鏈、四個亞鐵血紅素基團(tuán) D.兩條α-肽鏈、兩條β-肽鏈、兩個亞鐵血紅素基團(tuán) 解析 血紅蛋白由四條肽鏈組成,包括兩條α-肽鏈和兩條β-肽鏈,其中每條肽鏈環(huán)繞一個亞鐵血紅素基團(tuán),共四個。 答案 C 13.下面說法不正確的是( ) A.在一定范圍內(nèi),緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對溶液pH的影響,維持pH基本不變 B.緩沖溶液通常由1~2種緩沖劑溶解于水中配制而成 C.電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程 D.透析袋能使大分子自由進(jìn)出,而將小分子保留在袋內(nèi) 解析 透析袋一般是用硝酸纖維素(又叫玻璃紙)制成的。透析袋能使小分子自由進(jìn)出,而將大分子保留在袋內(nèi)。透析可以除去樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì),或用于更換樣品的緩沖液。 答案 D 14.下列關(guān)于凝膠色譜法的正確認(rèn)識是( ) A.凝膠實際上是一些微小的多孔球體,這些多孔球體是由脂類化合物構(gòu)成的 B.蛋白質(zhì)通過凝膠時,相對分子質(zhì)量較小的移動速度快,先分離出來 C.在色譜柱中裝填凝膠的時候要盡量緊密,以降低凝膠顆粒之間的空隙 D.蛋白質(zhì)通過凝膠時,相對分子質(zhì)量較大的移動速度慢,后分離出來 解析 凝膠多為多糖類物質(zhì),蛋白質(zhì)通過凝膠時,相對分子質(zhì)量小的所經(jīng)路程遠(yuǎn),移動速度慢,分離出來晚。 答案 C 15.已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子,其分子大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如下圖所示,下列有關(guān)蛋白質(zhì)分離的敘述正確的是( ) A.將樣品裝入透析袋中透析12小時,若分子乙保留在袋內(nèi),則分子丙也保留在袋內(nèi) B.若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì),則分子甲移動速度最快 C.若將樣品以2 000 r/min的速度離心10 min,分子戊存在于沉淀中,則分子甲也存在于沉淀中 D.若用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品中的蛋白質(zhì)分子,則分子甲和分子戊形成的電泳帶相距最遠(yuǎn) 解析 由圖可排列出分子質(zhì)量由大到小依次為:丙>丁>乙>戊>甲,透析法可除去樣品中分子質(zhì)量較小的雜質(zhì),若分子乙保留在袋內(nèi),則丙和丁也在袋內(nèi),A項正確;凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時,分子質(zhì)量越大的分離越快,則丙的移動速度最快,B項錯;如果戊存在于沉淀中,則丙、丁、乙也在沉淀中,甲不能確定,C項錯;“SDS”電泳過程中只和蛋白質(zhì)的分子量大小有關(guān),而與所帶電荷無關(guān),而分子量相差最遠(yuǎn)的是甲與丙,D項錯。 答案 A 二、非選擇題 16.某生物興趣小組在學(xué)習(xí)完“蛋白質(zhì)的提取和分離”后,聯(lián)系相關(guān)實驗,準(zhǔn)備從豬肝研磨液中初步提取過氧化氫酶,設(shè)計的“過氧化氫酶提取、分離流程圖”如下: ―→―→―→ 試回答下列有關(guān)問題: (1)向肝細(xì)胞懸液中加入一定量pH=7.0的緩沖液并充分?jǐn)嚢?,可以破碎肝?xì)胞,破碎細(xì)胞的原理是____________。與使用蒸餾水相比,使用緩沖液的優(yōu)點是____________。 (2)蛋白質(zhì)粗分離階段透析的目的是______________。 (3)電泳利用了待分離樣品中各種分子的__________________等的差異,而產(chǎn)生不同的遷移速度,實現(xiàn)各種分子的分離。 (4)實驗小組以3%過氧化氫溶液和獲得的過氧化氫酶為材料進(jìn)行溫度對酶催化活性影響的探究,得到下圖所示結(jié)果。 根據(jù)實驗結(jié)果得出“過氧化氫酶能耐受100 ℃高溫”的結(jié)論,請問這一結(jié)論是否可靠?為什么?______________________。 解析 破碎細(xì)胞方法為使細(xì)胞吸水漲破,所應(yīng)用原理為滲透作用,為了保證所提取H2O2酶活性,要保證液體pH等條件穩(wěn)定,故此應(yīng)加入緩沖液而不用蒸餾水。蛋白質(zhì)分離時透析的目的是除去小的雜質(zhì),在研究溫度對酶的活性的影響時,一般不用H2O2酶對H2O2的分解作用,因為溫度本身對H2O2分解有影響。 答案 (1)滲透原理 可以保證酶溶液pH基本穩(wěn)定,避免因pH變化影響H2O2酶活性 (2)除去小分子化合物(雜質(zhì)) (3)帶電性質(zhì)、分子大小、形狀(答對兩項得分) (4)不可靠,高溫也能促使過氧化氫分解 17.紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白,我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進(jìn)行實驗,來提取和分離血紅蛋白,血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步:樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定。請回答下列有關(guān)問題: (1)樣品處理,它包括______、____、收集血紅蛋白溶液。 (2)收集的血紅蛋白溶液在透析袋中經(jīng)過透析,這就是樣品的粗分離。透析的目的是________________________________。透析的原理是_______________________________________________________ _________________。 (3)通過凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化,最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。樣品純化的目的是__________________________。 解析 樣品的處理包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液。透析的目的是除去相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì);應(yīng)用的原理是半透膜的選擇透過性,具體說就是小分子能自由出入,大分子保留在袋中。純化的目的是將分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去。 答案 (1)紅細(xì)胞的洗滌 血紅蛋白的釋放 (2)去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) 透析袋能使小分子自由進(jìn)出,而大分子則保留在透析袋內(nèi) (3)通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去 18.測定蛋白的相對分子質(zhì)量是研究蛋白的一項重要技術(shù),常用凝膠(由多孔性網(wǎng)狀物質(zhì)構(gòu)成的顆粒,其孔能讓小分子物質(zhì)進(jìn)出)過濾法測定,即在一根垂直的玻璃柱中裝滿凝膠,然后在其上端加入蛋白混合液并用緩沖液進(jìn)行洗脫。根據(jù)各種蛋白質(zhì)洗脫的先后順序可以比較它們的相對分子質(zhì)量大小。利用下列材料,鑒定樣品液(含有A、B兩種相對分子質(zhì)量大小不同的蛋白質(zhì))中蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小。 材料用具:支架臺、符合要求的凝膠柱、吸管、緩沖液洗脫瓶、帶有開關(guān)的玻璃導(dǎo)管、橡膠軟管、夾子、試管若干、足量的緩沖液等。 (1)實驗步驟: ①加樣前先___________________________________________ _____________________________; ②加樣:________________________________________________ ___________________; ③洗脫:________________________________________________ ____________________; ④收集并檢測它們洗脫的先后順序。 (2)實驗結(jié)果及結(jié)論: ________________________________________________________________________。 (3)請用坐標(biāo)圖表示出不同蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量大小與洗脫液體積的關(guān)系。 解析 凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法,相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道,在凝膠外部移動,速度快、路程短;而相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì),擴(kuò)散進(jìn)入凝膠內(nèi)部而被滯留,需要更多的緩沖液將它們洗脫出來,這樣相對分子質(zhì)量不同的分子得以分離,這是凝膠色譜法的實驗原理。加樣前,應(yīng)先使凝膠柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到與凝膠面平齊;加樣時,注意不要破壞凝膠面,緩沖液洗脫前,應(yīng)先使樣品滲入凝膠床,加緩沖液洗脫。根據(jù)實驗原理,誰先洗脫出來,誰的相對分子質(zhì)量大,洗脫液消耗少;反之洗脫液消耗多。 答案 (1)①將凝膠柱垂直固定在支架臺上,打開色譜柱下端的流出口,使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到與凝膠面平齊,關(guān)閉出口?、谟梦苄⌒膶? mL含有A、B兩種蛋白質(zhì)的混合樣液加到色譜柱頂端,注意不要破壞凝膠面;打開下端出口,使樣品滲入凝膠床內(nèi)后關(guān)閉下端出口?、坌⌒募尤刖彌_液到適當(dāng)高度,連接緩沖液洗脫瓶,打開下端出口,用緩沖液進(jìn)行洗脫 (2)經(jīng)過檢測若A先于B洗脫出來,則A的相對分子質(zhì)量大于B;若B先于A洗脫出來,則B的相對分子質(zhì)量大于A (3) 19.回答下列有關(guān)提取生物體內(nèi)物質(zhì)的問題: (1)血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細(xì)胞的主要組成部分,其在紅細(xì)胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有________功能。我們應(yīng)選用________的血液進(jìn)行實驗。取新鮮的血液,要切記在采血容器中預(yù)先加入________。 (2)甲裝置中,B是血紅蛋白溶液,則A是________;乙裝置中,C溶液的作用是________。 (3)甲裝置用于________,目的是________________。用乙裝置分離蛋白質(zhì)的方法叫________,是根據(jù)________________分離蛋白質(zhì)的有效方法。 (4)最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行________。 (5)圖丙為用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的結(jié)果。根據(jù)結(jié)果,某同學(xué)得出:“提取的血紅蛋白有兩條肽鏈”的結(jié)論,這種說法可靠嗎?并說明理由_________________________________ _______________________________________。 解析 (1)血紅蛋白可運輸氧氣,以供給組織細(xì)胞利用。因哺乳動物成熟的紅細(xì)胞無細(xì)胞核及其他細(xì)胞器,所以是提取血紅蛋白的良好實驗材料。 (2)在一定范圍內(nèi),磷酸緩沖液可維持pH基本不變,從而保持血紅蛋白的活性正常。磷酸緩沖液還可洗脫血紅蛋白。 (3)透析袋相當(dāng)于半透膜,可除去樣品中相對分子量較小的雜質(zhì)。 (4)電泳利用樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,可進(jìn)行純度的鑒定。 答案 (1)運輸 哺乳動物(豬、牛、羊) 檸檬酸鈉(抗凝劑) (2)磷酸緩沖液 洗脫血紅蛋白(洗脫) (3)透析(粗分離) 去除樣品中分子量較小的雜質(zhì) 凝膠色譜法 相對分子質(zhì)量的大小 (4)純度鑒定 (5)不可靠。只能得出提取的血紅蛋白含有兩種大小不同的肽鏈,不一定是兩條- 1.請仔細(xì)閱讀文檔,確保文檔完整性,對于不預(yù)覽、不比對內(nèi)容而直接下載帶來的問題本站不予受理。
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