高考生物二輪復(fù)習(xí)專題突破訓(xùn)練15 基因工程與細(xì)胞工程 Word版含答案
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1、 專題突破練15 基因工程與細(xì)胞工程 1.(2017東北三省三校一聯(lián),38)馬鈴薯是重要的經(jīng)濟(jì)作物,人類在(馬鈴薯的)基因育種方面取得豐碩成果。 (1)馬鈴薯是雙子葉植物,常用 法將目的基因?qū)腭R鈴薯體細(xì)胞中。構(gòu)建好的基因表達(dá)載體包括目的基因、 、 、 、復(fù)制原點五部分。? (2)馬鈴薯得病會導(dǎo)致產(chǎn)量下降。基因工程中常用的抗病基因為 (寫一種即可)。? (3)科學(xué)家還培育出抗除草劑的轉(zhuǎn)基因馬鈴薯,主要從兩個方面進(jìn)行設(shè)計: ①修飾除草劑作用的靶蛋白,使其對除草劑 ,或使靶蛋白過量表達(dá),植物吸收除草劑后仍能
2、正常代謝。? ②引入酶或酶系統(tǒng),在除草劑發(fā)生作用前 。? (4)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,還需對轉(zhuǎn)基因植物進(jìn)行 。? 答案 (1)土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 啟動子 終止子 標(biāo)記基因 (2)病毒外殼蛋白基因、病毒的復(fù)制酶基因、幾丁質(zhì)酶基因和抗毒素合成基因 (3)①不敏感?、诒环纸狻?4)目的基因的檢測與鑒定 解析 (1)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的常用方法是土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。構(gòu)建好的基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因、復(fù)制原點等。(2)基因工程中常用的抗病基因有病毒外殼蛋白基因、病毒的復(fù)制酶基因、幾丁質(zhì)酶基因和抗毒素合成基因(寫一種
3、即可)。(3)①為了避免馬鈴薯對除草劑敏感,可以修飾除草劑作用的靶蛋白;或者增加馬鈴薯中靶蛋白的表達(dá)量,這樣植物吸收除草劑后仍能正常代謝。②還可以通過基因工程引入能夠快速分解除草劑的酶或酶系統(tǒng),從而將除草劑在發(fā)生作用前分解。(4)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,需檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。即使目的基因?qū)肓耸荏w細(xì)胞,也不一定能夠表達(dá),故一定要在受體生物中檢測出目的基因的產(chǎn)物——相關(guān)蛋白質(zhì),即要進(jìn)行目的基因的鑒定。 2.(2017湖北武漢一模,38)基因敲除是應(yīng)用DNA重組原理發(fā)展起來的一門新興技術(shù)。“基因敲除細(xì)胞”的構(gòu)建過程如下: 第一步,從小鼠囊胚中分離出胚胎干細(xì)胞(ES),在培養(yǎng)基中擴(kuò)增
4、。這些細(xì)胞中需要改造的基因稱為“靶基因”; 第二步,構(gòu)建基因表達(dá)載體。取與靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入neoR(新霉素抵抗基因)等。由于同源臂與靶基因的DNA正好配對,所以能像“準(zhǔn)星”一樣,將表達(dá)載體準(zhǔn)確地帶到靶基因的位置; 第三步,將表達(dá)載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞,并與其內(nèi)靶基因同源重組,完成胚胎干細(xì)胞的基因改造; 第四步,基因改造后的胚胎干細(xì)胞增殖、篩選?;驹砣鐖D所示。 請根據(jù)上述資料,回答下列問題。 (1)實施基因工程的核心步驟是 ,基因表達(dá)載體中的 是位于基因首端的有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段;在構(gòu)建的過程中所需要的工具酶是
5、 。? (2)如果要獲得一只含目的基因的小鼠,則選擇的受體細(xì)胞通常是 ,原因是 。? (3)上述資料中neoR基因的作用最可能是 。為了鑒定目的基因是否成功表達(dá),有時進(jìn)行抗原—抗體雜交,目的蛋白相當(dāng)于 。? (4)該項技術(shù)具有廣闊的應(yīng)用前景,請試舉一例: 。? 答案 (1)構(gòu)建基因表達(dá)載體 啟動子 限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶 (2)受精卵 動物受精卵具有全能性(動物不能像植物那樣,利用
6、一個除受精卵以外的獨(dú)立的體細(xì)胞直接培養(yǎng)成完整的個體) (3)作為標(biāo)記基因,以便于篩選 抗原 (4)基因治療、動植物改良、利用動植物生產(chǎn)藥物等 解析 (1)基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建?;虮磉_(dá)載體中的啟動子是位于基因首端的有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點,能啟動轉(zhuǎn)錄過程;在構(gòu)建基因表達(dá)載體時,首先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運(yùn)載體,其次需要用DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組DNA分子。(2)受精卵的全能性最高,因此要獲得一只含目的基因的小鼠,常選擇受精卵作為受體細(xì)胞。(3)上述資料中,neoR基因(新霉素抵抗基因)可作為標(biāo)記基因,以便
7、于篩選。為了鑒定目的基因是否成功表達(dá),要進(jìn)行抗原—抗體雜交,目的蛋白相當(dāng)于抗原。(4)該項技術(shù)具有廣闊的應(yīng)用前景,可用于基因治療、動植物改良、利用動植物生產(chǎn)藥物等。 3.(2017河北衡水中學(xué)一模,38)科學(xué)家從某細(xì)菌中提取抗鹽基因,轉(zhuǎn)入煙草并培育成轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草。下圖是轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的培育過程,含目的基因的DNA和質(zhì)粒上的箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請分析回答下列問題。 (1)在該過程中,研究人員首先獲取了抗鹽基因(目的基因),并采用 技術(shù)對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增,該技術(shù)需要的條件是 、酶、原料、模板,該技術(shù)必須用
8、 酶;然后構(gòu)建基因表達(dá)載體,基因表達(dá)載體中除了具有目的基因、啟動子和終止子之外,還需具有 。? (2)用圖中的質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒,不能使用SmaⅠ酶切割,原因是 。圖中①②過程為防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化,應(yīng)選用 酶對外源DNA、質(zhì)粒進(jìn)行切割。? (3)為確定轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草是否培育成功,既要用放射性同位素標(biāo)記的 作探針進(jìn)行分子雜交檢測,又要在個體水平上鑒定,后者具體過程是
9、 。 ?導(dǎo)學(xué)號50074050?? 答案 (1)PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)) 引物 耐高溫的DNA聚合或熱穩(wěn)定DNA聚合 標(biāo)記基因 (2)SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因 BamHⅠ和HindⅢ (3)抗鹽基因(或目的基因) 將培育的煙草幼苗栽培于含有一定鹽的土壤中,觀察該煙草植株的生長狀態(tài) 解析 (1)依題意可知:抗鹽基因?qū)儆谀康幕?可采用PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)擴(kuò)增目的基因,該技術(shù)需要的條件是引物、酶、原料、模板;利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時,每次循環(huán)都是在 95 ℃ 時進(jìn)行變性、在55 ℃時進(jìn)行復(fù)制、在72 ℃
10、時延伸,所以該技術(shù)必須用耐高溫的DNA聚合酶或熱穩(wěn)定DNA聚合酶(或Taq酶)。基因表達(dá)載體由目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因等組成。(2)題圖顯示:質(zhì)粒上的M抗生素抗性基因和目的基因中都含有SmaⅠ酶的識別和酶切位點,若使用SmaⅠ酶切割,會破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因,因此不能使用SmaⅠ酶切割??果}基因(或目的基因)的兩側(cè)都有EcoRⅠ酶的識別和酶切位點,因此用EcoRⅠ酶切割目的基因會出現(xiàn)自身環(huán)化;BamHⅠ和HindⅢ酶識別和酶切位點分別位于目的基因的兩側(cè),而且質(zhì)粒中也有相應(yīng)的酶切位點,因此用BamHⅠ和HindⅢ同時進(jìn)行酶切,能完整地切下該抗原基因,同時保證目的基因
11、與質(zhì)粒的連接方式的唯一性,防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化。(3)檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,在分子水平上進(jìn)行檢測時,要用放射性同位素標(biāo)記的抗鹽基因(或目的基因)作探針進(jìn)行分子雜交檢測;在個體水平上進(jìn)行鑒定時,可將培養(yǎng)的煙草幼苗栽培于含有一定鹽的土壤中,觀察該煙草植株的生長狀態(tài)。 4.我國菊花主要有杭菊、亳菊、懷菊、貢菊等8種,是藥食兼優(yōu)的代表性植物。研究發(fā)現(xiàn)杭菊具有明顯的抗炎作用,懷菊具有良好的抗病毒作用(但是抗炎作用很弱)。結(jié)合所學(xué)知識回答下列問題。 (1)欲培育兼有明顯抗炎、抗病毒療效的菊花新品種,用杭菊和懷菊雜交的方法是做不到的,原因是? 。? (2)基因工程方
12、法為培育上述新品種提供了可能性,在實施基因工程過程中,最關(guān)鍵的步驟是 。受體細(xì)胞的選擇直接關(guān)系到實驗的成功與否以及新生植株的品質(zhì),我們一般選取未開花的幼枝的芽尖,理由有 、 (寫出兩個)。若想確定杭菊的受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入了懷菊的抗病毒基因,常用的檢測方法是 。? (3)如果利用植物體細(xì)胞雜交的方法培育“杭菊懷菊”雜種植株,首先要獲得這兩種植物細(xì)胞的 ,用聚乙二醇誘導(dǎo)處理后,誘導(dǎo)實驗材料再生出 ,再利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育出雜種植株。? (4)理論上利用植物體細(xì)
13、胞雜交和基因工程的方法均可以培育出抗炎、抗病毒的優(yōu)良菊花,這兩項技術(shù)的共同特點有 。? 答案 (1)二者存在生殖隔離 (2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建 不含病毒或含病毒極少 分化程度低或易誘導(dǎo)脫分化和再分化(答案必須是兩個方面) DNA分子雜交技術(shù) (3)原生質(zhì)體 細(xì)胞壁 (4)定向改造生物(或克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙) 解析 (1)杭菊和懷菊屬于兩個不同的物種,二者之間存在生殖隔離,所以二者之間不能進(jìn)行有性雜交。(2)基因工程的關(guān)鍵步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建;由于幼枝的芽尖具有不含病毒或含病毒極少、分化程度低或易誘導(dǎo)脫分化和再分化的特點,所以通常選取未
14、開花的幼枝的芽尖作為受體細(xì)胞;可用DNA分子雜交技術(shù)檢測懷菊的抗病毒基因(目的基因)是否導(dǎo)入了受體細(xì)胞。(3)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)首先要獲得這兩種植物細(xì)胞的原生質(zhì)體,用聚乙二醇誘導(dǎo)處理后,誘導(dǎo)實驗材料再生出細(xì)胞壁,再利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育出雜種植株。(4)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)和基因工程的共同特點是定向改造生物(或克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙)。 5.利用相關(guān)工程技術(shù)可以獲得抗黑腐病雜種黑芥—花椰菜植株,已知野生黑芥具有黑腐病的抗性基因,而花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病,技術(shù)人員用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化,并喪失再生能力,再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的
15、花椰菜原生質(zhì)體融合,流程如下圖。 據(jù)圖回答下列問題。 (1)該過程用到的工程技術(shù)有 和 。? (2)過程①所需的酶是 ,過程②PEG的作用是 ,經(jīng)過②操作后,需篩選出融合的雜種細(xì)胞,顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的葉綠體存在,可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。? (3)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓,其作用是 。原生質(zhì)體經(jīng)過細(xì)胞壁再生,進(jìn)而分裂和脫分化形成 。? (4)若分析再生植株的染色體變異類型,應(yīng)剪取再生植株和雙親植株的根尖,制成裝
16、片,然后在顯微鏡下觀察比較染色體的 ;將雜種植株栽培在含有 的環(huán)境中,可篩選出具有高抗性的雜種植株。?導(dǎo)學(xué)號50074051?? 答案 (1)植物體細(xì)胞雜交 植物組織培養(yǎng) (2)纖維素酶和果膠酶 促進(jìn)原生質(zhì)體的融合 (3)保持原生質(zhì)體完整性 愈傷組織 (4)形態(tài)和數(shù)目 黑腐病菌 解析 (1)據(jù)題圖可知,該流程圖表示先去掉兩種植物細(xì)胞的細(xì)胞壁,然后誘導(dǎo)融合獲得雜種細(xì)胞,通過植物組織培養(yǎng)獲得雜種植株。(2)植物細(xì)胞細(xì)胞壁的成分是纖維素和果膠,因此采用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁;聚乙二醇(PEG)的作用是讓原生質(zhì)體融合。(3)去掉細(xì)胞壁后獲得的原生質(zhì)體需要
17、放在適宜濃度的甘露醇溶液中,保持原生質(zhì)體的完整性,避免失水或吸水;在植物組織培養(yǎng)中,經(jīng)過脫分化后形成愈傷組織。(4)由于染色體在顯微鏡下能看見,因此可以制作臨時裝片,觀察染色體的形態(tài)和數(shù)目,以確定是否發(fā)生染色體變異;對雜種植株進(jìn)行鑒定最簡單的方法是從個體水平上進(jìn)行檢測,即接種黑腐病菌,觀察植物是否抗病。 6.(2017河北衡水中學(xué)押題檢測,38)細(xì)胞的種類不同,特異性表達(dá)的蛋白質(zhì)也不同,如效應(yīng)T細(xì)胞可以產(chǎn)生干擾素,乳腺細(xì)胞可以分泌乳腺蛋白,膀胱壁細(xì)胞可分泌尿血小板溶素膜蛋白。其中效應(yīng)T細(xì)胞產(chǎn)生的干擾素(IFN)具有抑制細(xì)胞分裂、調(diào)節(jié)免疫、抗病毒、抗腫瘤等多種作用。請回答下列問題。 (1)通
18、過分析干擾素的氨基酸序列,可人工合成編碼干擾素的 序列,該序列 (填“是”或“不是”)唯一的。利用PCR的方法對人工合成的干擾素基因擴(kuò)增時,用 方法使DNA變性。? (2)若將干擾素基因?qū)氚┘?xì)胞,在 的環(huán)境、一定的營養(yǎng),適宜的溫度和pH,氣體環(huán)境等條件下培養(yǎng)癌細(xì)胞,可從培養(yǎng)液中源源不斷地提取到干擾素。? (3)目的基因在血液中表達(dá)的轉(zhuǎn)基因動物叫做血液生物反應(yīng)器。由于某些物質(zhì)進(jìn)入血液會影響動物的健康,因此血液生物反應(yīng)器比較適合生產(chǎn) (選填“胰島素”“抗體”或“干擾素”中的一種或多種)。? (4)乳腺生物反應(yīng)器的原理是外源基因與
19、 的啟動子構(gòu)建成基因表達(dá)載體,使干擾素基因在乳腺中表達(dá),通過回收乳汁獲得干擾素。? (5)膀胱生物反應(yīng)器可將干擾素基因插入 基因中,使干擾素分泌到尿液中。與乳腺生物反應(yīng)器相比,膀胱反應(yīng)器的優(yōu)勢表現(xiàn)在 。? 答案 (1)脫氧核苷酸 不是 加熱 (2)無菌、無毒 (3)抗體、干擾素 (4)乳腺蛋白基因 (5)尿血小板溶素膜蛋白 生產(chǎn)周期短、不受性別和年齡的限制 解析 (1)目的基因的獲取可以采用人工合成的方法,即通過分析干擾素的氨基酸序列,可人工合成編碼干擾素的脫氧核苷酸序列,由于一種氨基酸可以由多種密碼子決定,因此通過該
20、方法獲得的序列不是唯一的。利用PCR的方法對人工合成的干擾素基因擴(kuò)增時,用加熱方法使DNA變性。(2)若將干擾素基因?qū)氚┘?xì)胞,采用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)癌細(xì)胞,可從培養(yǎng)液中源源不斷地提取到干擾素。(3)胰島素在動物的血液中會降低動物的血糖,對動物有害;而抗體和干擾素屬于免疫活性物質(zhì),對動物健康有利,因此血液生物反應(yīng)器比較適合生產(chǎn)抗體、干擾素。(4)乳腺生物反應(yīng)器的原理是外源基因與乳腺蛋白基因的啟動子構(gòu)建成基因表達(dá)載體,使干擾素基因在乳腺中表達(dá),通過回收乳汁獲得干擾素。(5)膀胱生物反應(yīng)器可將干擾素基因插入尿血小板溶素膜蛋白基因中,使干擾素分泌到尿液中。與乳腺生物反應(yīng)器相比,膀胱生物反應(yīng)器的優(yōu)勢
21、表現(xiàn)在生產(chǎn)周期短、不受性別和年齡的限制。 7.(2017遼寧大連二模,38)白細(xì)胞介素4(IL-4)是具有多種免疫學(xué)調(diào)節(jié)功能的細(xì)胞因子,臨床及研究中需要大量高純度的IL-4,以及其高效檢測試劑。下圖是利用單克隆抗體技術(shù)制備抗IL-4特異性抗體的過程?;卮鹣嚓P(guān)問題。 (1)在免疫系統(tǒng)組成中,IL-4屬于 物質(zhì)。研究人員從外周血中提取到IL-4蛋白分子的mRNA,將其反轉(zhuǎn)錄成 ,構(gòu)建特定表達(dá)載體,利用工程菌獲得用于臨床及研究需要的高純度的IL-4蛋白。? (2)圖中所示的a培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的是 細(xì)胞,其與M細(xì)胞融合產(chǎn)生雙核或多核細(xì)胞,再經(jīng) ,進(jìn)一步形成兩
22、個新的單核雜交細(xì)胞。? (3)b培養(yǎng)瓶所示過程中,要用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞篩選,得到的 細(xì)胞能在體外培養(yǎng)增殖生長。經(jīng)b獲得的細(xì)胞,還需要進(jìn)行 。? (4)c培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的細(xì)胞是 的雜交瘤細(xì)胞。制備IL-4單克隆抗體的過程中,細(xì)胞培養(yǎng)瓶通常置于特定培養(yǎng)箱中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),要求培養(yǎng)瓶松蓋,主要目的是 。? 答案 (1)免疫活性 cDNA (2)骨髓瘤 有絲分裂 (3)融合的雜種(雜交瘤) 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(或答“克隆化培
23、養(yǎng)和專一抗體陽性檢測”) (4)分泌抗IL-4抗體(答出此意即可) 讓O2進(jìn)入培養(yǎng)瓶以供細(xì)胞代謝、使CO2進(jìn)入培養(yǎng)瓶維持培養(yǎng)液的pH 8.近年來,由于食品安全、環(huán)境污染等問題的加重,胃癌的發(fā)病率不斷增加。常見的切除、化療、放療等治療手段對病人的身體副作用較大,而“生物導(dǎo)彈”(借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用,能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在位置)的定向治療為胃癌患者帶來了福音。下圖是“生物導(dǎo)彈”——抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程。 回答下列問題。 (1)幽門螺旋桿菌的感染與胃癌的發(fā)生密切相關(guān),幽門螺旋桿菌從細(xì)胞結(jié)構(gòu)上與人體細(xì)胞相比,最顯著的特點是 。?
24、 (2)從免疫學(xué)的角度分析,圖中實驗小鼠注射的甲是 ,從小鼠的 (免疫器官)中可獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。? (3)誘導(dǎo)細(xì)胞融合形成細(xì)胞乙的原理是 。若只考慮細(xì)胞的兩兩聯(lián)合,理論上乙有 種類型,符合要求的細(xì)胞特點是 。? (4)丙需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測,經(jīng)多次篩選后可獲得數(shù)量較多的能分泌所需抗體的細(xì)胞丁,細(xì)胞丁可在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng),也可以注射到小鼠 內(nèi)進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng),從而獲得大量的單克隆抗體。該抗胃癌單克隆抗體與從動物血清中分離的抗體相比,最主要的優(yōu)點是
25、 。? 答案 (1)沒有核膜包被的細(xì)胞核 (2)能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原 脾臟 (3)細(xì)胞膜的流動性 3 既能大量繁殖又能產(chǎn)生特異性抗體 (4)腹腔 特異性強(qiáng),靈敏度高,并可大量制備 解析 (1)幽門螺旋桿菌是原核生物,幽門螺旋桿菌從細(xì)胞結(jié)構(gòu)上與人體細(xì)胞相比,最顯著的特點是沒有核膜包被的細(xì)胞核。(2)從免疫學(xué)的角度分析,圖中實驗小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原,從小鼠的脾臟中可獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。(3)誘導(dǎo)細(xì)胞融合形成細(xì)胞乙的原理是細(xì)胞膜的流動性,若只考慮細(xì)胞的兩兩融合,理論上乙有3類,B淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞的融合,骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合,B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合。符合要求的細(xì)胞的特點是既能無限制增殖,又能產(chǎn)生特異性抗體。(4)經(jīng)過篩選后的雜交瘤細(xì)胞,可在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng),也可以注射到小鼠腹腔內(nèi)進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng),從而獲得大量的單克隆抗體。該胃癌單克隆抗體與從動物血清中分離的抗體相比,最主要的優(yōu)點是特異性強(qiáng),靈敏度高,可大量制備。
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